【摘要】 本发明公开了一种海洋双菌共固定化体系的构建和造纸废水处理的方法。采用两种海洋真菌－微紫青霉菌和内生拟盘多毛孢菌进行共固定化。双菌共固定化体系和用于造纸废水处理的步骤为：(1)海洋微紫青霉菌菌丝球的制备：将微紫青霉菌接种到培养基中进行培养，形成具有一定机械强度的菌丝球；(2)共固定化菌丝球的制备：以海洋微紫青霉菌菌丝球为载体在含有一定海洋内生拟盘多毛孢菌J63孢子浓度的固定化培养基中进行固定化；(3)共固定化菌丝球用于造纸废水处理：将制得的共固定化菌丝球直接放入造纸废水中进行处理，得到纯清度好、几乎无色的水。本发明所开发的双菌共固定化方法，具有简单、快速、高效等优点，而且不需要进行任何物理或化学处理。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210119413.2 【申请日】2012-04-23 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102757951B 【公开公告日】2014-01-29 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102757951B 【授权公告日】2014-01-29 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N11/02; C02F3/34; C12R1/80; C12R1/645; C02F103/28 【发明人】姚善泾; 陈慧英; 冯晓雨; 林东强 【主权项内容】1.一种海洋双菌共固定化体系的构建和造纸废水处理的方法，其特征在于它的步骤如下： 1)海洋微紫青霉菌菌丝球的制备： 将保存于4 ℃的海洋微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)CP1固体斜面取出，用无菌水制成浓度为ｎ=106～109个·mL-1的孢子悬液，以3～5 %的接种量接入含100 mL菌丝球培养基的500 mL锥形瓶中，于160～180 rpm, 26～30 ℃下摇床培养4～5天，然后用水将多余的菌丝体洗去，过滤收集菌丝球，放入冰箱备用，菌丝球培养基的组成为：葡萄糖 10～15 g/L，酒石酸铵 2～3 g/L，KH2PO4 2～3 g/L，MgSO4·5H2O 0.5～1.0 g/L，酵母提取物 2～3 g/L，pH 4.0～5.0，海洋微紫青霉菌CP1保藏在中国典型培养物保藏中心，地址为中国.武汉.武汉大学，保藏日为2012年1月11日，命名Penicillium janthinellum CP1，保藏号为CCTCC M 2012006； 2)固定化菌丝球制备： 首先，用100 mL预先灭过菌的蒸馏水制备浓度为1.0～3.0×109个/mL的海洋内生拟盘多毛孢菌J63孢子悬浮液，用于接种；接着，取5～10 g海洋微紫青霉菌CP1菌丝球，接种于含有固定化培养基的三角瓶中；然后，用移液管移取10 mL海洋内生拟盘多毛孢菌J63孢子悬浮液接种于上述已经接有海洋微紫青霉菌CP1菌丝球的三角瓶中，使得海洋内生拟盘多毛孢菌J63孢子悬浮液的最终浓度为1.0～3.0×108个/mL；最后，海洋内生拟盘多毛孢菌J63孢子和海洋微紫青霉菌CP1菌丝球在含有固定化培养基的三角瓶中共固定化生长1～3天，培养结束后，用水将多余的菌丝体洗去，过滤收集菌丝球，放入冰箱备用，固定化培养基的组成为：葡萄糖 20～30 g/L，酒石酸铵 4～6 g/L，KH2PO4 4～6 g/L，MgSO4·5H2O 0.5～1.0 g/L，酵母提取物 2～3 g/L，pH 4.0～5.0，海洋内生拟盘多毛孢菌J63已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国.武汉.武汉大学，保藏号为CCTCC M 2010300，保藏日为2010年11月13日； 3)固定化菌丝球用于造纸废水的处理 称取2～5 g固定化菌丝球，加入到含有100 mL按1：4稀释的造纸废水的250 mL三角瓶中振荡处理6～10 h，转速140～160 rpm, 温度28-30 ℃，以不加固定化菌丝球的处理为空白对照，在相同的条件下处理，废水处理效果用生物降解率 Y%来表征，即： 其中，A1为处理结束后空白对照测得的浊度；A2为处理结束后样品测得的浊度，本发明结果表明，用固定化菌丝球对造纸废水进行6～10 h的振荡处理，生物降解率可达96-99%。 【当前权利人】浙江大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000470095016Q 【引证次数】1.0 【自引次数】1.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】10

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