【摘要】 本发明提供一种用于HPLC测定丝瓜种子内源激素含量的样品前处理方法，其处理步骤包括：制备待测丝瓜种子植物激素粗提液；浓缩粗提液后，再加入3ml、pH=8.0、0.1mol/L磷酸缓冲溶液；冷冻去脂，过滤除杂；用0.5mol/L稀盐酸调解至pH=3.0~3.5，再用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并酯相；将酯相浓缩后，用流动相定容至1ml，经0.45μm的微孔滤膜过滤，用于HPLC分析。本方法操作简单，成本低，可以一次处理多个样品，可节省时间，纯化过程中未做过柱处理，减少了待测物在提取过程中的损失。本方法可用于多种植物激素的提取的前处理，并可满足高效液相色谱对样品处理的要求。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210267580.1 【申请日】2012-07-31 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102830183B 【公开公告日】2014-01-29 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102830183B 【授权公告日】2014-01-29 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】G01N30/02; G01N30/06 【发明人】胡晋; 秦国臣; 王洋; 朱岩芳; 祝水金 【主权项内容】1.一种用于HPLC测定丝瓜种子内源激素含量的样品前处理方法，其特征在于，其处理步骤包括：1)制备待测丝瓜种子植物激素粗提液：准确称取1.000 g去除外种皮的丝瓜种子，在液氮条件下研成粉末，并装入10ml带盖离心管中，加入6 ml的冷乙腈，密封放入4℃冰箱浸提24 h，10000 r/m低温离心10 min取上清液，再向残渣中加入4 ml的冷乙腈低温超声振荡1 h，10000 r/m离心10 min取上清液，重复提取2次，合并3次上清液；2)浓缩粗提液后，再加入3 ml 、pH=8.0、0.1mol/L磷酸缓冲溶液；3)冷冻去脂，过滤除杂：将步骤2)所得溶液放入-80 ℃超低温冰箱中冰冻30 min，然后在4℃条件下解冻，10000 r/m低温离心15 min，过滤弃去杂质即可；4)用0.5 mol/L稀盐酸调解至pH=3.0~3.5，再用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并酯相；5)将酯相浓缩后，用流动相定容至1 ml，经0.45 μm的微孔滤膜过滤，用于HPLC分析。 ： 【当前权利人】浙江大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000470095016Q 【家族被引证次数】7

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