【摘要】 本发明公开了一种三七总皂苷的微生物发酵提取方法，包括以下步骤：1)微生物固态发酵：将三七根粉与麸皮按1.5~4 : 1的重量比混合后作为发酵基质，在灭菌后发酵基质中加入灭菌后磷酸盐缓冲溶液，得发酵底物；在发酵底物中加入枯草芽孢杆菌的菌液，培养，得发酵曲；2)三七总皂苷的提取：将发酵曲用乙醇溶液回流提取，所得的残渣重复用乙醇溶液回流提取；合并两次回流提取所得的上清，得三七总皂苷提取液。本发明的三七总皂苷的微生物发酵提取方法，具有反应条件温和、提取效率高、能增加稀有皂苷成分提取量的特点。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210185786.X 【申请日】2012-06-05 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102676627B 【公开公告日】2014-04-30 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102676627B 【授权公告日】2014-04-30 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12P33/20; C12R1/125 【发明人】沈生荣; 于海宁; 杨婧娟 【主权项内容】三七总皂苷的微生物发酵提取方法，其特征是包括以下步骤：1)、微生物固态发酵：将三七根粉与作为营养辅料的麸皮按1.5～4 : 1的重量比混合后作为发酵基质，将发酵基质进行灭菌，得灭菌后发酵基质；将pH=7～8、且浓度为0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液进行灭菌，得灭菌后磷酸盐缓冲溶液；按照每g发酵基质配用1～1.4ml的pH=7～8、且浓度为0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液的比例；在灭菌后发酵基质中加入灭菌后磷酸盐缓冲溶液，得发酵底物；然后在无菌条件下进行以下操作：按照每g发酵基质配用0.1～0.2mL枯草芽孢杆菌的菌液的接种量，在发酵底物中加入枯草芽孢杆菌的菌液，搅拌均匀后，于34.8～35.2℃培养90～100h，得发酵曲；所述枯草芽孢杆菌的菌液的制备方法为包括如下步骤：①、将1g豆粕渣与pH=7～8、且浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液28～32mL混合，得液体种子发酵培养基，灭菌，得灭菌后液体种子发酵培养基；②、在无菌条件下，在步骤①所得的灭菌后液体种子发酵培养基中接种1～2环的枯草芽孢杆菌，于140～160rpm、36.8～37.2℃的条件下培养22～26h；得枯草芽孢杆菌的菌液；2)、三七总皂苷的提取：将发酵曲用体积浓度为68～72%的乙醇溶液回流提取，所述乙醇溶液与步骤1)中的发酵基质的用量比为：7.5～8.5ml的乙醇溶液/g发酵基质；回流提取时间为1.2～1.8h；回流提取结束后，离心，分别得首次上清和残渣；将残渣用体积浓度为68～72%的乙醇溶液回流提取，所述乙醇溶液与步骤1)中的发酵基质的用量比为：4.5～5.5ml的乙醇溶液/g发酵基质；回流提取时间为1.2～1.8h；回流提取结束后，离心，得二次上清；合并首次上清和二次上清，得三七总皂苷提取液。 【当前权利人】浙江大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000470095016Q 【引证次数】2.0 【自引次数】1.0 【他引次数】1.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】7

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