【摘要】 本发明提供一种从胡柚白皮层分离纯化柚皮苷和新橙皮苷的方法，用大孔树脂和高速逆流色谱的联用技术，以胡柚白皮层烘干粉末为原料，先制备大孔树脂粗提物粉末；再通过高速逆流色谱进一步分离、纯化得到高纯度的柚皮苷和新橙皮苷。本发明操作简单，无需高温高压及惰性气体保护，合成工艺简单；无需使用有较大刺鼻气味的试剂，生产流程安全易操作；可用于分离利用性质非常接近的黄酮类化合物，适用性广；生产周期短，纯化回收率、纯度和准确度高；样品用量少，设备投入少，条件稳定容易控制，最终纯化的柚皮苷和新橙皮苷纯度均≥95%，适用于工业化生产和科学研究。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210045574.1 【申请日】2012-02-25 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102617673B 【公开公告日】2014-07-23 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102617673B 【授权公告日】2014-07-23 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C07H17/07; C07H1/08 【发明人】孙崇德; 李鲜; 张九凯; 陈昆松 【主权项内容】1.一种从胡柚白皮层分离纯化柚皮苷和新橙皮苷的方法，其特征在于，通过以下步骤实现： (1)制备大孔树脂粗提物粉末：按照固液比1 : 25的比例取烘干的提取材料胡柚白皮层与80%乙醇，超声提取两次，超声提取温度为40℃，4000 rpm离心20 min，合并两次上清液，在旋转蒸发仪上蒸干得浸膏，溶于ddH2O中，将提取液上D101大孔树脂、冲洗、洗脱，收集洗脱液、浓缩、干燥得大孔树脂粗提物粉末； (2)分离柚皮苷和新橙皮苷：按4 : 3 : 1 : 2配制氯仿-甲醇-正丁醇-水溶剂体系，充分摇匀过夜后，上相为固定相，下相为流动相，固定相首先以20 mL/min流速泵入高速逆流色谱，稳定后，将转速调至800 rpm，同时流动相以2 mL/min速度通过高速逆流色谱，待流出液分层后进样大孔树脂粗提物粉末，根据色谱仪检测器采集的图谱分管收集各组分，用HPLC测定各组分的纯度，分别合并含有单一柚皮苷和新橙皮苷的试管，在旋转蒸发仪上50℃蒸干即得到柚皮苷和新橙皮苷； 其中步骤(1)所述的上D101大孔树脂、冲洗、洗脱条件为：柱床体积为20 mL, 上样流速2 mL/min，先用水冲洗4 柱床体积，然后依次用10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%乙醇溶液梯度洗脱，每个梯度洗4 柱床体积，洗脱流速为2 mL/min，合并10%-60%洗脱液。 【当前权利人】浙江大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000470095016Q 【被引证次数】8 【被他引次数】8.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】17

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