【摘要】 本发明提供检测高血压相关的线粒体DNA A4263G突变的试剂盒，由引物序列、提取样本基因组DNA的试剂、PCR扩增反应试剂、阳性标本对照、阴性标本对照以及使用说明书构成。本发明试剂盒以少量的样本(如一滴毛细血管静脉血、带毛囊的毛发、口腔粘膜刮片或唾液)，通过蛋白酶K消化裂解法提取基因组DNA，通过设计引物进行分段巢式PCR扩增，然后通过特异性的限制性内切酶StyⅠ酶切鉴定的方法检出高血压相关的线粒体突变位点。本发明实现了无创伤检测，较单独进行线粒体DNAA4263G突变的检测更快速、经济、简便，且对设备及环境要求低，利于推广和应用，适用于高血压相关人群的大规模筛查和预防性检查。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210546972.1 【申请日】2012-12-17 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103031380B 【公开公告日】2014-04-16 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN103031380B 【授权公告日】2014-04-16 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12Q1/68 【发明人】管敏鑫; 蒋萍萍; 冀延春; 肖云; 刘浩 【主权项内容】1.一种检测高血压相关的线粒体DNAA4263G突变的试剂盒，由盒体、引物序列、提取样本基因组DNA的试剂、PCR扩增反应试剂、阳性标本对照、阴性标本对照构成，其中，提取样本基因组DNA的试剂由细胞裂解液和溶液Ⅰ组成；PCR扩增反应试剂包括脱氧单核苷酸、10×PCR缓冲液、MgCl2、三蒸水和DNA聚合酶；其特征在于，所述的引物序列是：外前向引物F : TGG CTC CTT TAA CCT CTC CA，外反向引物R : AAG GAT TAT GGA TGC GGT TG；内前向引物F : ACG ACC AAC TCA TAC ACC TC，内反向引物R : AGT ACG GGA AGG GTA TAA CC；限制性内切酶为限制性内切酶StyⅠ；阳性标本对照是含有线粒体序列第4263位点发生A>G突变的酶切样本，阴性标本对照是不含有线粒体序列第4263位点发生A>G突变的酶切样本；所述溶液Ⅰ的主要成分是蛋白酶K。 【当前权利人】浙江大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000470095016Q 【引证次数】3.0 【他引次数】3.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】4

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