【摘要】 本发明公开了一种应用多重PCR阵列技术的核酸检测方法。包括：通用标签(UT)序列，通用标签序列与特异性检测引物组成的引物对(5’-UT引物+特异检测引物-3’)，含有该通用标签序列或引物对的试剂盒，及其它们在核酸生物检测中的应用。所述UT序列满足以下条件：①上下游引物的UT序列不同、Tm值相差不超过±1℃，且大于检测引物Tm值5-10℃左右；②UT序列为随机设计的DNA片段，与待检测生物的序列间无同源性。本发明的检测方法，通过mPCR结合通用标签序列的方法，以提高核酸检测的灵敏度和特异性。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江医学高等专科学校 【申请人类型】学校 【申请人地址】310053 浙江省杭州市滨江区滨文路481号浙医高专基础医学部 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】滨江区 【申请号】CN201210289505.5 【申请日】2012-08-15 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102936593B 【公开公告日】2014-11-26 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102936593B 【授权公告日】2014-11-26 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N15/11; C12Q1/68; C12Q1/14; C12Q1/04 【发明人】杜蓬; 张磊; 邵世和; 孙爱华; 王黎芳; 周海鸥; 银国利; 何方; 蒋锦琴; 花扣珍; 覃江凤 【主权项内容】1.一种引物对，含有通用标签序列(UT序列)，以及检测引物对，且UT序列加在每条检测引物的5’端；其中，所述UT序列由24个碱基组成，并满足以下条件：①上下游引物的UT序列不同、Tm值相差不超过±1℃，且大于检测引物Tm值5-10℃左右；②UT序列为随机设计的DNA片段，与待检测生物的核酸序列间无同源性；其中，所述UT序列由多组四个碱基组成的随机四聚体，该四聚体应满足：(1)四聚体间至少要有两个碱基是互不相同的；(2)四聚体之间不能彼此互补；(3)四聚体不应自身配对；(4)四聚体不能由两个重复碱基对组成；其中UT序列由6组随机四聚体组成；其中UT序列由以下6组随机四聚体组成：CAGC、GGTA、GACC、ACCT、ATCG、TGCG或CTGT、AGCC、GGAC、TTGA、AGCC、GGAC；UT序列具体是：F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCG；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGAC；和/或F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACC；R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGAC；和/或F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACC；R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGAC；上述所提到的引物对，其是：F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGCCTGAATCTTCTGGTAAAAC；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACGTTTCTGGGCTGCCAAACATTAC；和/或F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGCATTATCACGGTAATTAGTG；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACAGAGCACTGTGCACTTAAG；和/或F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGTAATGCTTTGATCGGCTT；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACTGGATTGCACTTCATCTTGG；和/或F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGCAACCGTACAGAATGAAGCGG；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACTTATTCGTGCAATACTCGTGCG；和/或F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGATTTCTGTAACAGCTACCAACGA；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACGAATTCCCTGTCTTTTCAAAGTC；和/或F：CAGCGGTAGACCACCTATCGTGCGGCCCTAATAAATTGGAGGATCTAATGA；R：CTGTAGCCGGACTTGAAGCCGGACGACCAGAAGTTGTATCTTTTTTTCCG；和/或F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACCGCTGCGGTAGGTGGTTCAA；R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGACTTGTCGCGGATTTGCAACTA和/或F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACCGCTGGCGCCGCTGGCAACAAAATTC；R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGACCTTCTGCAGATTGCGGCGTGCCGT；和/或F：GGTAACCTTGCGCAGCATCGGACCCGGCTCGTTTATCGGCTT；R：AGCCTTGAGGACCTGTAGCCGGACGGTATTTCGTTTCAGCCAAGC；和/或F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACCGAGTACCAAACTGCTAACACAGGTACTC；R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGACAGCTGGTTTGCAGCTTC；和/或F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACCGCTGATTTAAGAGATAGAGGAACA；R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGACTTTATGTGGTTATTTGCTGTC；和/或F：TGCGCAGCATCGACCTGGTAGACCTCCGCCTGCAAGTCCTAAG；R：GGACCTGTAGCCTTGAAGCCGGACGGCGGCACATTTGTCACTG。 ： 【当前权利人】浙江医学高等专科学校 【当前专利权人地址】浙江省杭州市滨江区滨文路481号浙医高专基础医学部 【统一社会信用代码】12330000470051857B 【引证次数】4.0 【他引次数】4.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】7

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