【摘要】 ： 本发明公开了一种间日疟醛缩酶(aldolase)蛋白单克隆抗体的制备方法，该抗体是针对以aldolase蛋白为靶抗原，选择A、B、C三个优势抗原表位，通过柔性片段连接A、B、C三个优势抗原表位，形成重组子D，并在其上下游分别添加BamHI和XhoI限制性内切酶酶切位点，双酶切后插入载体PET-28a(+)载体中，构建重组蛋白D表达载体，利用大肠杆菌BL21表达重组蛋白D，免疫Balb/c小鼠，取其脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合，筛选得到10株稳定分泌aldolase蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本发明所得单克隆抗体能特异性识别间日疟原虫aldolase蛋白，可用于间日疟感染的特异性检测，特异性高，反应灵敏，实验成本低，适合高通量快速检测。 【专利类型】发明授权 【申请人】杭州傲锐生物医药科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】311121 浙江省杭州市余杭区文一西路1500号1号楼209室 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】余杭区 【申请号】CN201210165773.6 【申请日】2012-05-25 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102690351B 【公开公告日】2014-07-16 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102690351B 【授权公告日】2014-07-16 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C07K16/40 【发明人】陈东; 张海燕; 庞醒华 【主权项内容】1.编码间日疟原虫醛缩酶蛋白的抗原表位重组核酸序列，其特征在于，所述核酸序列是由柔性片段GGCAGCGGCAGCGGC将间日疟原虫醛缩酶蛋白的抗原表位A、B、C的编码核酸序列相连接所得到的重组子D；其中，抗原表位A的编码核酸序列为：GAGGGAATCATTCCAGGAATTAAAGTTGAC AAAGGATTGGTTACCATCCCATGCACTGATGATGAGAAGTCCACCCAGGGATTAGATGGTCTAGCTGAGAGGTGTAAAGAATATTACAAAGCTGGTGCAAGGTTTGCAAAATGGAGAGCT；抗原表位B的编码核酸序列为：ATTGGTTTTCTCACAGTGAGAACTTTAAGTA GGACAGTGCCACCATCCTTACCAGGAGTTGTATTCTTATCTGGAGGTCAATCTGAAGAAGAAGCATCTGTCAATTTGAATTCCATCAATGCGTTAGGCCCACACCCATGGGCGTTGACC；抗原表位C的编码核酸序列为：AACTCCTTGGCGACTTATGGAAAGTACAAGG GAGGTGCAGGCGGAGCCGATGCAGGAGCATCCCTT；重组子D的编码核酸序列为：GAGGGAATCATTCCAGGAATTAAAGTTGAC AAAGGATTGGTTACCATCCCATGCACTGATGATGAGAAGTCCACCCAGGGATTAGATGGTCTAGCTGAGAGGTGTAAAGAATATTACAAAGCTGGTGCAAGGTTTGCAAAATGGAGAGCTGGCAGCGGCAGCGGCATTGGTTTTCTCACAGTGAGAACTTTAAGTAGGACAGTGCCACCATCCTTACCAGGAGTTGTATTCTTATCTGGAGGTCAATCTGAAGAAGAAGCATCTGTCAATTTGAATTCCATCAATGCGTTAGGCCCACACCCATGGGCGTTGACCGGCAGCGGCAGCGGCAACTCCTTGGCGACTTATGGAAAGTACAAGGGAGGTGCAGGCGGAGCCGATGCAGGAGCATCCCTT。 【当前权利人】杭州奥泰生物技术股份有限公司 【当前专利权人地址】浙江省杭州市江干区杭州经济技术开发区白杨街道银海街550号第3幢第4幢第5幢厂房 【专利权人类型】有限责任公司(自然人投资或控股的法人独资) 【统一社会信用代码】9133011059660391XC 【引证次数】1.0 【他引次数】1.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】4

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