【摘要】 一种脱氧河鲀毒素的提取方法，先将粗品河鲀毒素用醋酸溶解，并加入无水乙醇搅拌均匀，离心除去其中的不溶物，得到河鲀毒素上清液，将上清液在装有乙醚的密闭容器中加温，析出河鲀毒素结晶，并得到母液；将上述母液浓缩后，加入氨水调节pH值，析出沉淀物，将此沉淀物通过处理后，即可获得含脱氧河鲀毒素沉淀物；将此沉淀物加入醋酸或磷酸溶解，使用高效制备液相色谱仪对其进行液相色谱分离，使用示差折光检测器或紫外检测器进行检测，按出峰图谱可收集到脱氧河鲀毒素的馏分；将上述馏分，加入层析柱中，用醋酸溶液进行洗脱，收集馏分；然后使用氨水调节此馏分的pH值即可析出白色固体将白色固体，经过处理后，即可得到脱氧河鲀毒素结晶。 【专利类型】发明授权 【申请人】河北省海洋与水产科学研究院 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】066200 河北省秦皇岛市海港区东港路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】秦皇岛市 【申请人区县】海港区 【申请号】CN201210071281.0 【申请日】2012-03-15 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102627652B 【公开公告日】2014-05-07 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102627652B 【授权公告日】2014-05-07 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C07D491/22 【发明人】黄海枫; 赵振良; 黄致强; 吴新民; 赵海涛; 冯子龙; 郝志毅 【主权项内容】1.一种脱氧河鲀毒素的提取方法，其特征包括以下步骤： 一、制备河鲀毒素母液 先将粗品河鲀毒素置于玻璃烧杯中，加浓度为7％-15％的醋酸溶解，得到“A”溶液，在“A”溶液中加入剂量为“A”溶液量1-10倍的无水乙醇，搅拌均匀，溶解后得到“B”溶液，将“B”溶液通过离心机分离，除去其中的不溶物，得到河鲀毒素上清液；将河鲀毒素上清液倒入烧杯后，移到密闭容器中，然后在密闭容器内放置一杯乙醚溶液，将密闭容器内的温度控制在10℃-35℃；当乙醚向河鲀毒素-醋酸-乙醇-水溶液扩散后，经过10-60小时的反应，即可析出河鲀毒素结晶，得到母液“C”； 二、高效液相色谱分离 将母液“C”真空加热浓缩后，加入氨水将母液“C”pH值调节至7.5-10后，析出沉淀物，将此沉淀物通过水洗、真空冷冻干燥处理后，即可获得白色的含脱氧河鲀毒素沉淀物；将此白色的含脱氧河鲀毒素沉淀物加入浓度为20％-30％的醋酸或磷酸溶解，得到“D”溶液；使用高效制备液相色谱仪对“D”溶液进行液相色谱分离，色谱条件：C18反相柱；流动相为含有1mmol/L-15mmol/L离子对试剂的0.05mol/L-0.5mol/L缓冲液和0.5％-5％甲醇，其流动相的流速为6mL/min-15mL/min；使用示差折光检测器或紫外检测器进行检测；在高效液相色谱分离过程中，按出峰图谱可收集到脱氧河鲀毒素的馏分； 三、层析脱盐处理 将上述脱氧河鲀毒素馏分，缓慢加入装有生物凝胶或酸性阳离子树脂的层析柱中，再用浓度为3％-20％的醋酸溶液进行洗脱，收集pH值为4-7的馏分；然后使用氨水将此馏分的pH值调节至7.5-10，即可析出白色固体；将白色固体经过水洗和真空冷冻干燥处理后，即可得到纯度较高的脱氧河鲀毒素结晶； 所述的第二步骤中的离子对试剂为辛烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、已烷磺酸钠、戊烷磺酸钠其中一种； 所述的缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液。 【当前权利人】河北省海洋与水产科学研究院 【当前专利权人地址】河北省秦皇岛市海港区东港路2号 【引证次数】3.0 【他引次数】3.0 【家族引证次数】3.0

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