【摘要】 适用于多种样本的DNA提取试剂配制方法和提取方法，它涉及生物技术领域，它样本的预处理过程为：刮取口腔细胞，将口腔细胞拭子浸入到1.5mlPBS溶液中，震荡混匀，然后再将液体转入新的Ep管中，采用离心机进行离心2-5min，吸弃上清液，只保留沉淀，它的DNA样本的提取过程为：在样本沉淀中加入350-420ul的溶解液1和10-15ul的20mg/ml蛋白酶K涡旋混匀30-40min，温度为60-80℃，期间每隔10min震荡一次，然后进行DNA样本的纯化处理及检测。它简化了提取步骤，只需要经过细胞裂解、漂洗和溶解三个步骤，使提取质量和纯度得到大幅提升，并适用于多种不同样本，降低了成本。 【专利类型】发明申请 【申请人】河北省健海生物芯片技术有限责任公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】050000 河北省石家庄市高新区黄河大道136号21层 【申请人地区】中国 【申请人城市】石家庄市 【申请人区县】裕华区 【申请号】CN201210554081.0 【申请日】2012-12-19 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103882006A 【公开公告日】2014-06-25 【公开公告年份】2014 【IPC分类号】C12N15/10 【发明人】杨利霞; 修贺明 【主权项内容】 1.适用于多种样本的DNA提取试剂配制方法和提取方法，其特征在于：(1)、样本的预处理过程为：刮取口腔细胞，将口腔细胞拭子浸入到1.5ml PBS溶液中，震荡混匀，然后再将液体转入新的Ep管中，采用离心机进行离心2-5min，吸弃上清液，只保留沉淀；(2)、DNA样本的提取过程为：在样本沉淀中加入350-420ul的溶解液1和10-15ul 的20 mg /ml 蛋白酶K涡旋混匀30-40min，温度为60-80℃，期间每隔10min震荡一次；(3)、DNA样本的纯化处理及检测过程为：取出Ep管瞬甩，加入180-200 ul的溶解液2，60-80℃保温10-15min，将Ep管中的液体转移到新的1.5ml的Ep管中，采用离心机进行离心，离心6-8min，抽吸上清液到另一个Ep管中，然后加入等体积的冷的异丙醇，颠倒混匀，采用离心机进行离心5-10min，缓缓倒出上清液，在干净的吸水纸上倒扣Ep管将其中少量的液体倒出，再加入1-3ml的 70%乙醇洗涤沉淀，采用离心机进行离心5-8min，缓缓倒出上清，在干净的吸水纸上倒扣Ep管使其中少量的液体自然流出，并晾干15-20min，加入30ul的DNA溶解液3，涡旋5秒，瞬甩，再采用离心机离心5-8min，吸取上清液，然后转移到新的Ep管中，采用分光光度计检测OD值。 【当前权利人】河北省健海生物芯片技术有限责任公司 【当前专利权人地址】河北省石家庄市高新区黄河大道136号21层 【专利权人类型】有限责任公司 【统一社会信用代码】91130101695855506E 【引证次数】4.0 【被引证次数】6 【他引次数】4.0 【被他引次数】6.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】6

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