【摘要】 本发明涉及一种高效诱导L-阿拉伯糖异构酶方法，主要是在以乳糖操纵子质粒pET-22b(+)构建的L-阿拉伯糖异构酶重组菌表达目的蛋白诱导表达过程中，添加酶底物D-半乳糖，促进L-阿拉伯糖异构酶的有效折叠，高效诱导L-阿拉伯糖异构酶的活性表达，有效提高活性酶的表达量。本发明提高了以乳糖操纵子质粒pET-22b(+)构建的L-阿拉伯糖异构酶重组菌的活性L-阿拉伯糖异构酶的表达量与发酵酶活，从而可以大幅度降低L-阿拉伯糖异构酶的发酵生产成本；所得产品L-阿拉伯糖异构酶是一种新型糖酶，可以催化D-半乳糖合成高附加值的功能性稀有糖—D-塔格糖，具有广阔的市场前景。 【专利类型】发明授权 【申请人】江苏梁丰食品集团有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】215600 江苏省苏州市张家港市港城大道245号 【申请人地区】中国 【申请人城市】苏州市 【申请人区县】张家港市 【申请号】CN201210320390.1 【申请日】2012-08-31 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102888389B 【公开公告日】2014-12-31 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102888389B 【授权公告日】2014-12-31 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N9/90; C12R1/19 【发明人】季万兰; 江波; 沐万孟; 李晓卉; 丁美琴; 刘炯; 刘知远; 韩晓明 【主权项内容】1.一种诱导L-阿拉伯糖异构酶的方法，其以乳糖操纵子质粒pET-22b(+)构建的L-阿拉伯糖异构酶重组菌为出发菌，利用诱导剂诱导L-阿拉伯糖异构酶的活性表达，其特征在于：所述诱导剂为D-半乳糖与诱导剂IPTG的组合，D-半乳糖的添加浓度为0.01～10mmol/L，诱导剂IPTG的添加浓度为0.1～1mmol/L，所述乳糖操纵子质粒pET-22b(+)构建的L-阿拉伯糖异构酶重组菌为含解纤维热酸菌(Acidothermus cellulolytics)L-阿拉伯糖异构酶的大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3)或含嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)L-阿拉伯糖异构酶的大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)。 【当前权利人】江苏梁丰食品集团有限公司 【当前专利权人地址】江苏省苏州市张家港市港城大道245号 【专利权人类型】有限责任公司 【统一社会信用代码】913205827115801526 【家族被引证次数】1

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