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一种核酸检测方法专利

时间:2026-10-10    作者:admin 点击: ( 1 ) 次

【摘要】 本发明公开了一种核酸检测方法,包括:(1)根据目标核酸分子的序列设计合成锁式探针和扩增引物;(2)将待测的DNA或RNA的逆转录产物预处理后,与锁式探针、连接酶和缓冲液混合,连接反应后加热使连接酶变性失活;(3)以连接产物为模板,利用扩增引物进行滚环扩增;(4)滚环扩增完成后,往滚环扩增体系中添加磁珠,使扩增产物聚集,然后整体转移至滤纸上,晾干;(5)肉眼观察滤纸表面,判断待测的DNA或RNA中是否含有目标核酸分子。本发明方法所需实验装置简单,仅需要移液器、恒温加热器即可完成整个检测,与常规方法相比,成本大为降低。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210271932.0 【申请日】2012-08-01 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102827929B 【公开公告日】2014-06-04 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102827929B 【授权公告日】2014-06-04 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12Q1/68 【发明人】姚波; 林彩琴 【主权项内容】1.一种非诊断目的的核酸检测方法,包括:(1)根据目标核酸分子的序列设计合成锁式探针和扩增引物;(2)将待测的DNA或RNA的逆转录产物预处理后,与锁式探针、连接酶和缓冲液混合,连接反应后加热使连接酶变性失活;(3)以连接产物为模板,利用扩增引物进行滚环扩增;(4)滚环扩增完成后,往滚环扩增体系中添加磁珠,使扩增产物聚集,然后整体转移至滤纸上,晾干;(5)肉眼观察滤纸表面,判断待测的DNA或RNA中是否含有目标核酸分子;所述目标核酸分子为人乳头瘤病毒基因;所述锁式探针为:PO3-GTTTTCTTCCTCGCTAAGTCTAAGAAAGTAGGATAGGACAGATAGCCATCTATTTCATC;所述扩增引物为:TTTCTTAGACTTAGCG;所述连接酶为Taq DNA连接酶;所述磁珠为超顺磁性纳米微球。 【当前权利人】浙江大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区浙大路38号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000470095016Q 【引证次数】4.0 【被引证次数】5 【他引次数】4.0 【被他引次数】5.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】24

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