【摘要】 本发明公开了一种铁皮石斛组织培养一步成苗的方法，该方法通过合理调配培养基中两种激素的比例和剂量，同时加入活性炭等辅料，使得铁皮石斛种子直接发育成幼苗，将幼苗转接到壮苗培养基之后，成活率达99.5%以上。本发明可将铁皮石斛组织培养的成苗时间缩短2个月，显著提高培养效率，降低经济成本，可作为铁皮石斛组培苗生产的重要方法。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江省中药研究所有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】310023 浙江省杭州市西湖区西溪路553号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】西湖区 【申请号】CN201210368914.4 【申请日】2012-09-27 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102845308B 【公开公告日】2014-03-26 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102845308B 【授权公告日】2014-03-26 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】A01H4/00 【发明人】沈晓霞; 沈宇峰; 王志安 【主权项内容】1.一种铁皮石斛组织培养一步成苗的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)制备成苗培养基：以B5为基础培养基，每升B5培养基中添加0.1mg的6-苄氨基嘌呤、0.3mg的α-萘乙酸、2.0g的活性炭、3.5g的琼脂和30g的蔗糖，加热至沸腾，加热过程中搅拌，待琼脂完全溶解后，调节pH值至6.0，得成苗培养基；均匀地将成苗培养基分装于培养容器中，边分装边搅拌，避免活性炭沉底，分装完毕后加盖；培养容器加盖后，放入高压灭菌锅内灭菌，灭菌条件为：121℃下灭菌20分钟，灭菌后取出培养容器，冷却后备用； (2)铁皮石斛果实灭菌：将铁皮石斛果实放入水中清洗干净；在无菌条件下，将铁皮石斛果实在体积百分比浓度为75%的乙醇溶液中浸泡1分钟，取出用无菌水清洗若干遍，放入体积百分比浓度为2%的次氯酸钠溶液灭菌10分钟，再用无菌水清洗若干遍，吸干水分后放入无菌培养皿中备用； (3)接种：解开铁皮石斛果实的果皮，把种子均匀地洒在成苗培养基表面，盖紧盖子； (4)培养：将完成接种的培养容器移入培养室，培养条件为：温度25℃，光照时间每天12小时，光照强度l500～2000lx，培养时间约为3个月，得到0.5-1.0 cm的幼苗； (5)转接：首先配置壮苗培养基：每升B5培养基中添加0.5mg 的6-苄氨基嘌呤、1.0mg的α-萘乙酸、3.0g的活性炭、3.0g的琼脂和30g的蔗糖，加热至沸腾，加热过程中搅拌，待琼脂完全溶解后，调节pH值至6.0，得壮苗培养基；然后将幼苗转接至壮苗培养基，继续培养，直至苗高5-6cm时，移栽至大棚。。 【当前权利人】浙江省中药研究所有限公司 【当前专利权人地址】浙江省杭州市西湖区西溪路553号 【专利权人类型】其他有限责任公司 【统一社会信用代码】91330000738426112D 【引证次数】2.0 【被引证次数】1 【自引次数】1.0 【他引次数】1.0 【被他引次数】1.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】12

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