【摘要】 本发明公开了一种获得可溶性克隆表达的斑马鱼肌酸激酶蛋白方法，依次包括以下步骤：1)、在导入ckmt2基因的大肠杆菌的菌液中加入IPTG至IPTG的终浓度为0.9～1.1mM；摇床培养；菌液的OD600nm为0.4～0.6；2)、将步骤1)的所得菌液先离心，弃上清，所得的沉淀中先加入PBS重悬，重悬后再加入溶菌酶，使溶菌酶的终浓度为180～220μg/mL；3)、先将上述步骤的所得物于36.5～37.5℃处理8～12min，然后于液氮中冰冻38～42秒；再于室温中自然解冻至液态；4)、重复上述步骤3)2次；5)、将步骤4)的所得物先离心，取上清，上清中含有可溶性的斑马鱼肌酸激酶融合蛋白。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江理工大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】310018 浙江省杭州市下沙高教园区2号大街5号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】上城区 【申请号】CN201210035220.9 【申请日】2012-02-16 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102533690B 【公开公告日】2014-02-12 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102533690B 【授权公告日】2014-02-12 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N9/12; C12R1/19 【发明人】黄涵年; 赵铁军; 马琴琴; 郭江峰; 丁先锋 【主权项内容】1.获得可溶性克隆表达的斑马鱼肌酸激酶蛋白的方法，其特征是依次包括以下步骤：1)、在导入斑马鱼ckmt2基因的大肠杆菌的菌液中加入IPTG至IPTG的终浓度为0.9~1.1mM；220 rpm、 36.5~37.5℃培养摇床振荡继续培养4.5~5.5小时；所述菌液的OD600nm为0.4~0.6；2)、将步骤1)的所得菌液先于11000g~13000g离心9~11min，弃上清，所得的沉淀中先加入PBS重悬，重悬后再加入溶菌酶，使溶菌酶的终浓度为180~220 mg/mL；3)、先将上述步骤的所得物于36.5~37.5℃处理8~12 min，然后于液氮中冰冻38~42秒；再于室温中自然解冻至液态；4)、重复上述步骤3)2次；5)、将步骤4)的所得物先于11000g~13000g离心9~11min，取上清，所述上清中含有可溶性的斑马鱼肌酸激酶蛋白。。该数据由<>整理 【当前权利人】浙江理工大学 【当前专利权人地址】浙江省杭州市下沙高教园区2号大街5号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12330000470009034M

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