【摘要】 本发明公开了一种微生物转化法制备胆固醇的方法，该方法完全通过微生物转化，以羊毛脂为原料生产胆固醇，步骤包括1)将原料粉碎，加入碳源和氮源，制备种子培养基和发酵培养基；2)筛选菌种；3)接入菌种，搅拌发酵；4)分离提纯结晶；上述方法制备胆固醇，具有条件温和、反应专一、污染小等特点。通过该方法制得的胆固醇的纯度较高，且收率大，符合环保理念。 【专利类型】发明授权 【申请人】河南利伟生物药业股份有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】454850 河南省焦作市温县产业聚集区鑫源路中段 【申请人地区】中国 【申请人城市】焦作市 【申请人区县】温县 【申请号】CN201210163047.0 【申请日】2012-05-24 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102676626B 【公开公告日】2014-09-03 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102676626B 【授权公告日】2014-09-03 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12P33/00 【发明人】马志军; 薛家禄 【主权项内容】一种微生物转化法制备胆固醇的方法，其特征是：该方法完全通过微生物转化，以羊毛脂为原料生产胆固醇，步骤如下：1)将原料粉碎，加入碳源和氮源，制备种子培养基和发酵培养基；2)筛选菌种；3)接入菌种，搅拌发酵；4)分离提纯结晶；所述步骤2中的菌种筛选方法为：a、在洗羊毛废弃物倾倒处和胆固醇生产工厂分别采集土壤样品；b、取上述采集的土壤样品1.0g，置消毒试管中，加入无菌水10ml后以涡旋振荡器振荡摇匀，静置后取上层清液，滴于种子培养基上，以玻璃棒涂匀，置于27℃恒温培养箱中培养2-5d，待平板上长出菌落后，挑出单菌落于新的种子培养基上，根据形态特征判断纯的菌株，编号保存；c、将分离得到的几十个菌株分别接种在种子培养基中，待长出单菌落后，取菌落下面的培养基1.0g放置于试管中，加三氯甲烷10ml并震荡，使培养基中可能存在的胆固醇充分溶解，再加入硫酸10ml；观察，若三氯甲烷层显血红色，则此菌株具备转化能力；若不显血红色，则不具备转化能力；d、将筛选获得的菌株在种子培养基上培养，菌落质地致密、表面呈较紧密的绒状或坚实、干燥、多皱，可初步猜测菌株为放线菌；e、进一步挑取细菌制作玻片，在显微镜下观察，细菌呈分枝丝状，可进一步确定菌株为放线菌。 【当前权利人】河南利伟生物药业股份有限公司 【当前专利权人地址】河南省焦作市温县产业聚集区鑫源路中段 【专利权人类型】股份有限公司(非上市、自然人投资或控股) 【统一社会信用代码】914108007156796005 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】1

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