【摘要】 本发明涉及干细胞体外定向诱导软骨支架材料及其制备方法。本发明的技术方案要点是：干细胞体外定向诱导软骨支架材料，包括海绵状胶原支架和PLGA微球，PLGA微球内包载有TGF-β1，上述PLGA微球置于纤维蛋白中。本发明提供了一种胶原支架材料与细胞因子复合均一、内部释放一致和机械性能优越以及良好的生物相容性、可降解性和无免疫性的干细胞体外定向诱导软骨支架材料的制备方法。本发明所提供的胶原/纤维蛋白/PLGA微球复合支架材料与现有材料比较具有机械性能好、生物相容性、可降解性及无免疫原性优越的显著优点。 【专利类型】发明授权 【申请人】新乡医学院 【申请人类型】学校 【申请人地址】453002 河南省新乡市向阳路东段 【申请人地区】中国 【申请人城市】新乡市 【申请号】CN201210083397.6 【申请日】2012-03-27 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102618492B 【公开公告日】2014-01-08 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102618492B 【授权公告日】2014-01-08 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N5/071; C08J9/40; C08J9/28; C08L89/00 【发明人】陈红丽; 刘瑞; 王文锋; 王永学; 曹毓林; 丰慧根 【主权项内容】一种制备干细胞体外定向诱导软骨的支架材料的方法，其特征在于有以下步骤：(1)用体积浓度为0.3％丙二酸溶液将胶原分散液稀释至体积浓度为0.6％，在低温离心机中4℃，1500rpm离心15分钟，以除去分散液中的气泡；胶原分散液搅拌均匀，置于平整的不锈钢模具中；在-80℃超低温冰箱预冻后进行冷冻干燥，得到胶原海绵支架；(2)将步骤(1)制得的胶原海绵支架在体积浓度为0.3％的戊二醛溶液中浸泡，戊二醛交联液的pH值控制为8.4，交联反应时间2h，使胶原支架交联，将交联后的胶原海绵支架，放入去离子水中清洗，充分去除支架中残留的戊二醛，然后-80℃超低温冰箱预冻，重新放入冷冻干燥机中进行第二次冷冻干燥，得到胶原海绵支架；制备的胶原支架厚度控制在0.4±0.05cm，孔径平均为56.5±14.6μm；(3)用液中干燥法制备载TGF-β1的PLGA微球，将TGF-β1溶于磷酸盐缓冲溶液中，加入到PLGA的二氯甲烷溶液中乳匀分散后，再将PLGA的溶液加入1％的聚乙烯醇水溶液中，持续搅拌待二氯甲烷挥发后，离心收集微球，并冷冻干燥得到微球；液中干燥法中的外水相为1.0%的聚乙烯醇水溶液，内水相为pH7.2的磷酸盐缓冲溶液；离心条件为10分钟，转速8000rpm；载TGF-β1的PLGA微球光滑圆整，粒径为22.4±6.2μm，包封率为(86.21±2.31)%，载药量为(7.65±0.84)%；(4)将步骤(3)制备的包载TGF-β1的PLGA微球加入纤维蛋白原中，与凝血酶混合后迅速加入到胶原海绵支架内，得到干细胞体外定向诱导软骨支架材料，其中微球：纤维蛋白胶质量比=1 : 8~1 : 20，纤维蛋白胶：胶原海绵支架质量比=1 : 1~1 : 3。 【当前权利人】新乡医学院 【当前专利权人地址】河南省新乡市向阳路东段 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12410000417087789Y 【引证次数】3.0 【他引次数】3.0 【家族引证次数】3.0 【家族被引证次数】3

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