【摘要】 本发明公开了一种双孢蘑菇菌种的液体发酵培养方法，包括：(1)取活化的0.5cm2斜面母种接种到装有60～120mL液体培养基的250mL培养瓶中，控温21～27℃，90～180rpm振荡培养5～7d得一级摇瓶菌种，按接种量为5～10%转接一级种子到二级培养液进行培养，再将培养好的二级摇瓶液体菌种转接到三级液体培养液进行培养，相同方法依次进行各级培养得种子液；(2)将种子液按5%的接种量接种至装有6L发酵培养基的10L发酵罐进行发酵培养，25℃培养5～6d即可。该方法生产周期短、菌龄一致、生产成本低、接种简便，一支试管种通过五级种培养就可以放大200000倍，液体二级菌种生长速度明显优于固体传统栽培种，速度提高了33%，同时，液体种各级之间的生长速度并没有太大差异，平均满瓶时间是27.5d，完全可以在工厂生产中实际应用。 【专利类型】发明授权 【申请人】连云港市农业科学院 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】222000 江苏省连云港市新浦区海连东路26号 【申请人地区】中国 【申请人城市】连云港市 【申请人区县】海州区 【申请号】CN201210023708.X 【申请日】2012-02-03 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102550293B 【公开公告日】2014-05-21 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102550293B 【授权公告日】2014-05-21 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】A01G1/04 【发明人】李冠喜; 温以斌; 李荣花; 秦裕营; 寇运书; 孟德龙; 华国栋; 马腾; 樊继伟; 梁长东; 王多明 【主权项内容】一种双孢蘑菇菌种的液体发酵培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取活化的0.5cm2斜面母种接种到装有60～120mL液体培养基的250mL培养瓶中，控温21～27℃，90～180rpm振荡培养5～7d得一级摇瓶菌种，按接种量为5～10%转接一级种子到二级培养液进行培养，再将培养好的二级摇瓶液体菌种转接到三级液体培养液进行培养，相同方法依次进行各级培养得种子液；其中，各级摇瓶培养条件相同：装液量为90mL，控温25℃，150rpm振荡培养5～6d，接种量为5%；液体培养基配方为：碳源，氮源10～20g，KH2PO41～3g，MgSO40.5～1.5g，VB110mg，水1000mL，pH5～7；碳源为20～30mL麦芽汁；氮源为玉米粉；碳氮比为3 : 1或2.5 : 1.5；其中，一级培养时，液体培养基配方为：麦芽汁30mL，玉米粉10g，KH2PO41g，MgSO40.5g，VB110mg，水1000mL，pH6.5；二级培养时，液体培养基配方为：玉米粉10g，蛋白胨20g，KH2PO41g，MgSO40.5g，VB110mg，水1000mL，pH6.5；(2)将步骤(1)所得的种子液按5%的接种量接种至装有6L发酵培养基的10L发酵罐进行发酵培养，25℃培养5～6d，即可；其中，发酵培养基配方为：麦麸30g，玉米粉10g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁1g、VB110mg/L，水1000mL，pH6.5。。 （，） 【当前权利人】江苏众友兴和菌业科技有限公司 【当前专利权人地址】江苏省徐州市睢宁县官山镇腾龙路江苏众友兴和菌业科技有限公司 【统一社会信用代码】12320700468049192R 【家族引证次数】8.0 【家族被引证次数】10

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