【摘要】 一种酶解和膜分离制备免疫活性大豆肽的方法，属于大豆蛋白深加工技术领域。本发明以脱脂大豆蛋白粉为原料，首先对其进行酸洗得到酸洗大豆蛋白，然后使用Alcalase蛋白酶在一定条件下进行酶水解得到粗大豆肽液；再采用微滤对所制备得到的粗大豆肽液进行澄清处理；然后采用超滤和纳滤进行富集和脱盐处理；最后通过干燥得到粉状的免疫活性大豆肽。采用中性红吞噬试验和淋巴细胞增殖法测定大豆肽活性表明，制备所得的大豆肽具有良好的免疫活性。 【专利类型】发明申请 【申请人】江南大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】滨湖区 【申请号】CN201010523747.7 【申请日】2010-10-29 【申请年份】2010 【公开公告号】CN101974589A 【公开公告日】2011-02-16 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN101974589B 【授权公告日】2012-11-21 【授权公告年份】2012.0 【IPC分类号】C12P21/06; C07K1/34 【发明人】华欲飞; 孔祥珍; 黄文凯; 董蝶; 张彩猛 【主权项内容】一种酶解和膜分离制备免疫活性大豆肽的方法，其特征在于所述方法步骤为：(1)对脱脂大豆蛋白粉进行酸洗得到酸洗大豆蛋白：以脱脂大豆蛋白粉为原料，按g/mL 为1 : 10~1 : 20加酸洗液，酸洗液采用质量浓度2g/L 的Na2SO3水溶液，调节pH4.0~5.0，温度50~60℃，洗涤时间10~20min，酸洗2~4次，酸洗后离心除去上清液，得到酸洗大豆蛋白；(2)使用Alcalase蛋白酶在一定条件下进行酶水解得到粗大豆肽液：将步骤(1)所得的酸洗大豆蛋白，按g/mL 为1 : 10~1 : 20加水，调节pH至8.0，调至pH8.0过程中，蛋白粘度逐渐增大，要搅匀，调节温度为55~65℃，添加Alcalase蛋白酶，E/S=1.0%~3.0%，反应过程中保持pH值恒定，当水解度DH=20%时，调节pH至4.0灭酶，3000r/min离心15min，所得上清液即为粗大豆肽液；(3)采用微滤、超滤和纳滤对所制备得到的粗大豆肽液进行澄清、富集、脱盐处理；采用微滤对所制备得到的粗大豆肽液进行澄清除杂处理：在室温下对大豆肽液进行全回流微滤操作，采用的微滤膜为孔径0.10~0.45μm的聚砜膜；在处理过程中，微滤以180min为一个运行周期，收集得到澄清透明的粗大豆肽液；运行周期结束后停机进行膜组件的清洗和再生；采用超滤对微滤后的粗大豆肽液进行富集处理：在室温下对微滤后的粗大豆肽液进行全回流超滤操作，采用的超滤膜的截留分子量MWCO为5000~8000，料液的大豆肽初始浓度为6.0%~8.0%，pH为4.0，压力在0.35～0.8MPa之间，收集滤出液，实现对活性大豆肽液的富集；采用纳滤对超滤后的粗大豆肽液进行脱盐处理：在室温下对超滤后的粗大豆肽液进行全回流纳滤操作，采用的纳滤膜的截留分子量MWCO为150~300，操作pH为4.0，压力在0.4~0.7MPa之间，收集滤出液；(4)对纳滤后收集的滤出液通过喷雾干燥得到粉状的免疫活性大豆肽；(5)采用吞噬中性红试验或淋巴细胞增殖法测定大豆肽活性，表明制备所得的大豆肽具有良好的免疫活性。 【当前权利人】安徽盛美诺生物技术有限公司 【当前专利权人地址】安徽省淮北市相山区凤凰山食品经济开发区栖凤路西凤冠路26号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1210000071780177X1 【被引证次数】19 【被自引次数】1.0 【被他引次数】18.0 【家族被引证次数】19

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