【摘要】 本发明涉及一种替考拉宁单组份的制备方法，属于微生物原料药品的制备领域。该方法包括将替考拉宁发酵液通过大孔脱色树脂脱色后，再用大孔吸附树脂吸附、解吸，浓缩后得到含有TA2-1、TA2-2、TA2-3、TA2-4、TA2-5和TA3-1六种组份的替考拉宁粗提物；粗提物用水溶解后借助聚合物微球进行层析分离，得到高纯度的替考拉宁TA2-1、TA2-2、TA2-3、TA2-4、TA2-5和TA3-1六个单组份。本发明使用新型层析介质—聚合物微球，可以从替考拉宁粗提物中同时分离得到六种单组份；该方法工艺简洁，样品处理量大，溶剂消耗少，可以规模化制备替考拉宁单组份，为替考拉宁单组份的病理学、毒理学等深入研究提供样品。 【专利类型】发明授权 【申请人】华北制药集团新药研究开发有限责任公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】050015 河北省石家庄市和平东路388号 【申请人地区】中国 【申请人城市】石家庄市 【申请人区县】长安区 【申请号】CN201210221634.0 【申请日】2012-06-30 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102718843B 【公开公告日】2014-05-14 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102718843B 【授权公告日】2014-05-14 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C07K9/00; C07K1/36; C07K1/22; C07K1/16 【发明人】张雪霞; 任风芝; 段宝玲; 董爱华; 蒋沁; 张志江; 李晓露; 李宁; 王海燕; 朱秀良; 林毅; 陈书红; 成晓迅; 李丽红 【主权项内容】一种替考拉宁单组份的制备方法，其特征在于：该方法包括下述步骤，步骤1)预处理：在常温条件下，在替考拉宁发酵液中加入碱溶液，调节pH至11.0～13.0；将发酵液固液分离，所得滤液用酸溶液调节pH至7.0～7.5，得到替考拉宁滤液；步骤2)脱色：将替考拉宁滤液导入大孔脱色树脂进行脱色，得到替考拉宁脱色液；步骤3)吸附：将替考拉宁脱色液导入大孔吸附树脂进行吸附，再用溶剂解吸，所得替考拉宁解吸液，经浓缩、结晶、干燥，得到替考拉宁的粗提物；步骤4)层析：将替考拉宁粗提物用水溶解，注入聚合物微球层析柱进行层析，所述层析介质为聚合物微球PS25-300、PS30RPC-300或PSA30-300的其中一种；然后用不同浓度的洗脱溶剂梯度洗脱，分别收集各段洗脱液，得到含有TA2-1、TA2-2、TA2-3、TA2-4、TA2-5和TA3-1六种单组份的替考拉宁单组份洗脱液；包括如下步骤，步骤A)将替考拉宁粗提物用蒸馏水溶解，注入聚合物微球层析柱进行层析，然后依次使用从低浓度到高浓度的洗脱溶剂梯度洗脱；步骤B)根据HPLC对替考拉宁中各单组份的检测结果，分别收集TA3-1、TA2-1和TA2-2的洗脱液；得到TA3-1、TA2-1和TA2-2三种替考拉宁单组份洗脱液；步骤C)根据HPLC对替考拉宁中各单组份的检测结果，分别收集TA2-2与TA2-3的HPLC峰面积百分比为1：2的混合液，TA2-4与TA2-5峰面积百分比为1：1的混合液；步骤D)将步骤C)中得到的两种混合液浓缩至混合液浓度为100g/L，再次注入聚合物微球层析柱进行层析分离，然后依次使用从低浓度到高浓度的洗脱溶剂梯度洗脱，根据HPLC检测结果，分别收集TA2-3、TA2-4和TA2-5的洗脱液，得到TA2-3、TA2-4和TA2-5三种替考拉宁单组份洗脱液；步骤5)将六种替考拉宁单组份洗脱液分别浓缩、结晶、干燥，得到替考拉宁的单组份精粉。 【当前权利人】华北制药集团新药研究开发有限责任公司 【当前专利权人地址】河北省石家庄市和平东路388号 【专利权人类型】有限责任公司 【统一社会信用代码】91130101601702200G 【引证次数】9.0 【他引次数】9.0 【家族引证次数】9.0 【家族被引证次数】12

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