【摘要】 一种同步获得两种以上同质多倍体的枣树多倍体种质创新方法，即对枣树一年生枝条短截后，用TDZ和AgNO3诱导截口产生愈伤组织，进而利用两次秋水仙素诱导截口产生不同倍性愈伤组织，经过芽再生，获得两种以上倍性的枣树同质多倍体。该技术可同步获得不同倍性的枣同质多倍体，不需要进行嵌合体的分离纯化，且对树体损害较小，所获多倍体的枝条可当年开花并完全木质化，第二年春天即可用于嫁接扩繁，可大大缩短多倍体育种周期。 【专利类型】发明授权 【申请人】河北农业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】071001 河北省保定市灵雨寺街289号 【申请人地区】中国 【申请人城市】保定市 【申请人区县】莲池区 【申请号】CN201210530993.4 【申请日】2012-12-11 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103004548B 【公开公告日】2014-11-05 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN103004548B 【授权公告日】2014-11-05 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】A01H1/06 【发明人】刘孟军; 刘平; 石庆华 【主权项内容】1.一种同步获得两种以上同质多倍体的枣树多倍体种质创新方法，其特征在于对枣树一年生枝条进行短截和截口愈伤组织诱导，进而用秋水仙素两次诱变截口愈伤组织，同步获得两种以上同质多倍体，包括以下几个步骤： (1)枝条中度短截 于生长季，选择健壮的枣树一年生枝条，从其中部进行短截； (2)不同倍性愈伤组织的诱导 枝条中度短截后，迅速用脱脂棉覆盖截口，将含有4.0mg/L TDZ、2.0mg/L AgNO3的药液滴加在脱脂棉上，使浸湿的脱脂棉与截面充分接触，覆上塑料袋，第2天去除塑料袋和脱脂棉，然后将湿泥覆盖在截口上，最外面用塑料袋全部套住并绑紧袋口；3-5d 后，去掉湿泥，用脱脂棉覆盖截口愈伤组织，将含有0.1%二甲基亚砜的0.025%-0.075%秋水仙素滴加到脱脂棉上，迅速覆上黑塑料袋，并绑紧袋口；12h 后，去除脱脂棉，用湿泥直接覆盖愈伤组织，再用塑料袋套住，绑紧袋口；3-4 d 后，再次用秋水仙素处理截口愈伤组织12h，具体操作方法同上； (3)不同倍性芽的再生 约15-20d后，在截口愈伤组织上有新芽长出，当芽长度达到2cm时，去除所有覆盖物，对新生芽进行染色体倍性检测。 【当前权利人】河北农业大学 【当前专利权人地址】河北省保定市莲池区灵雨寺街289号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12130000401707023F 【引证次数】3.0 【被引证次数】1 【自引次数】3.0 【被自引次数】1.0 【家族引证次数】3.0 【家族被引证次数】2

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