【摘要】 本发明公开了一种高特异高敏感检测肠聚集性大肠杆菌的方法，包括以下步骤：步骤1)制备反应液；步骤2)将上述反应液放入63℃烘箱进行反应30-60min，浑浊为阳性; 步骤3)提取临床分离肠聚集性大肠杆菌，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。本发明通过配制反应液，设计引物序列，能快速、准确的检测肠产毒性大肠杆菌，并及时采取相应的措施，减少了疾病的发生率。 【专利类型】发明申请 【申请人】苏州四同医药科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】215000 江苏省苏州市吴江经济开发区科技创业园 【申请人地区】中国 【申请人城市】苏州市 【申请人区县】吴江区 【申请号】CN201210380667.X 【申请日】2012-10-10 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103725756A 【公开公告日】2014-04-16 【公开公告年份】2014 【IPC分类号】C12Q1/68; C12Q1/10; C12Q1/14; C12Q1/04 【发明人】金京勋; 吕少波; 李苏杨 【主权项内容】1.一种高特异高敏感检测肠聚集性大肠杆菌的方法, 其特征在于，包括以下步骤：步骤1)制备反应液反应液组成及含量为8u/ul Bst核酸聚合酶 8u10X耐热聚合酶反应缓冲液 1X，MgSO4 2mM4M 甜菜碱 1M10mM d-NTP混合液 400μM内引物 EAEC-FIP 40umol EAEC-BIP 40umol外引物 EAEC-F3 5umol EAEC-B3 5umol标本核酸 20ng添加焦碳酸二乙酯处理水至总量达到25ul；步骤2)将上述反应液放入63℃烘箱进行反应30-60min，浑浊为阳性; 步骤3)提取临床分离肠聚集性大肠杆菌，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。 【当前权利人】苏州四同医药科技有限公司 【当前专利权人地址】江苏省苏州市吴江经济开发区科技创业园 【专利权人类型】有限责任公司 【统一社会信用代码】91320509564291659Y 【引证次数】7.0 【他引次数】7.0 【家族引证次数】7.0

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