【摘要】 本发明的绵羊MSTN基因启动子区两个新SNP位点检测及其检测方法的建立，分步骤；其1确定绵羊myostatin基因启动子区的两个单核苷酸突变位点，位于GeneBank序列，登记号：DQ530260；从起始密码子ATG开始第-959位和-784位，即为SNP位点(-959T/C，-784G/A)，表现为6种基因型(TT，TC，CC，GG，GA，AA)；其2检测到上述突变等位基因的三条特异性引物，长度分别为22bp、22bp、21bp；第一条引物用于MSTN基因的启动子区测序，第二、三条引物分别结合到两个突变等位基因模板链上，扩增到等位基因突变的目的基因；其3通过设计的寡核苷酸引物，对样品的基因组DNA进行PCR扩增，对扩增到985bp和121bp片段的产物，利用Psp1406I和Rsa I限制性内切酶进行酶切分析，建立SNP位点的PCR-RFLP检测体系，进而得到两个单核苷酸突变位点的多态性。 【专利类型】发明申请 【申请人】新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国 澳大利亚绵羊育种研究中心 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】830000 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市沙依巴克区克拉玛依东街151号 【申请人地区】中国 【申请人城市】乌鲁木齐市 【申请人区县】沙依巴克区 【申请号】CN201010580034.4 【申请日】2010-12-09 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102181517A 【公开公告日】2011-09-14 【公开公告年份】2011 【IPC分类号】C12Q1/68 【发明人】刘明军; 贺三刚; 陈芯; 张雪梅; 李文蓉; 张宁 【主权项内容】1.绵羊MSTN基因启动子区两个新SNP位点检测及其检测方法的建立，其特征在于：分以下步骤；其1确定绵羊myostatin基因启动子区的两个单核苷酸突变位点，位于GeneBank序列，登记号：DQ530260；从起始密码子ATG开始第-959位和-784位，即为SNP位点(-959T/C，-784G/A)，表现为6种基因型(TT，TC，CC，GG，GA，AA)；其2检测到上述突变等位基因的三条特异性引物，长度分别为22bp、22bp、21bp；其中P1引物F：TGAGAGTTTGATCCCTACAGAG，R：TGGCTTCTAGTCTTGAGGATT；用于MSTN基因的启动子区测序；P2引物F：TGAGAGTTTGATCCCTACAGAG，R：GAGCTGATTCATTTGACTACTTC；和P3引物F：GTAGTCAATCGAAACTGAAGT，R：CCCTGAATAAATTCTTAGCAC；分别结合到两个突变等位基因模板链上，扩增到等位基因突变的目的基因；其3通过设计的寡核苷酸引物，对样品的基因组DNA进行PCR扩增，对扩增到985bp和121bp片段的产物，利用Psp1406I和Rsa I限制性内切酶进行酶切分析，建立SNP位点的PCR-RFLP检测体系，进而得到两个单核苷酸突变位点的多态性。 【当前权利人】新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国 澳大利亚绵羊育种研究中心 【当前专利权人地址】新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市沙依巴克区克拉玛依东街151号 【被引证次数】5 【被他引次数】5.0 【家族被引证次数】5

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