【摘要】 本发明涉及K88大肠杆菌不同血清型的检测方法。该方法是先对待测样本进行PCR特异性检测，出现750bp条带的为待测样本为K88大肠杆菌，再分别用3对特异性引物对K88大肠杆菌DNA进行PCR扩增，根据扩增产物的500bp条带判断血清型。本发明的方法不仅分型结果准确无误，且没有假阳性和相互交叉反应的发生，还具有操作简便，可同时检测多个样品，成本较低的优点。 【专利类型】发明申请 【申请人】扬州大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】225009 江苏省扬州市大学南路88号 【申请人地区】中国 【申请人城市】扬州市 【申请人区县】广陵区 【申请号】CN201010574869.9 【申请日】2010-12-06 【申请年份】2010 【公开公告号】CN101979664A 【公开公告日】2011-02-23 【公开公告年份】2011 【IPC分类号】C12Q1/68; C12Q1/10 【发明人】朱国强; 郁磊; 吴圣龙; 包文斌; 朱春红; 羊扬; 王建业; 姚丰华; 朱军; 舒燕; 朱晓芳 【主权项内容】一种K88大肠杆菌不同血清型的PCR特异性检测和分型鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)K88大肠杆菌PCR特异性检测：以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的序列为引物，对待测样本DNA模板进行PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，出现750bp 条带的为待测样本为K88大肠杆菌；(2)分型鉴别：以步骤1确定为K88大肠杆菌的待测样本的DNA为模板，分别用下述3对引物进行PCR扩增：第1对：上游引物序列如SEQ ID NO：1，下游引物序列如SEQ ID NO：3；第2对：上游引物序列如SEQ ID NO：1，下游引物序列如SEQ ID NO：4；第3对：上游引物序列如SEQ ID NO：1，下游引物序列如SEQ ID NO：5；扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，根据出现500bp 条带所对应的引物来判断待测样本血清型：由第1对引物扩增出500bp 条带的，待测样本血清型为K88ab；由第2对引物扩增出500bp 条带的，待测样本血清型为K88ac；由第3对引物扩增出500bp 条带的，待测样本血清型为K88ad。 【当前权利人】扬州大学 【当前专利权人地址】江苏省扬州市大学南路88号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12320000466007837W 【引证次数】1.0 【被引证次数】3 【他引次数】1.0 【被他引次数】3.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】3

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