【摘要】 本发明公开了一种胶原基骨软骨三层复合物及其制备方法，所述复合物按如下方法制备：在模具中依次注入胶原-磷酸盐混合溶液，5~20mg/mL胶原水溶液和35~45mg/mL的胶原水溶液，形成致密胶原-多孔胶原-胶原水溶性磷酸盐复合物，将该复合物经无水乙醇、钙盐的无水乙醇溶液浸没处理后，再用EDC-NHS的MES溶液进行交联处理，获得所述胶原基骨软骨三层复合物；本发明方法提高三层支架的界面结合性能，防止骨软骨修复过程中出现层与层之间分裂的不良后果。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江星月生物科技股份有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】311121 浙江省杭州市余杭区仓前街道海曙路9号3幢2楼 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】余杭区 【申请号】CN201210206807.1 【申请日】2012-06-18 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102805881B 【公开公告日】2014-02-19 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102805881B 【授权公告日】2014-02-19 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】A61L27/40; C08J9/40; C08J9/28; C08J3/24 【发明人】赵洪石; 陈隆坤; 其他发明人请求不公开姓名 【主权项内容】一种胶原基骨软骨三层复合物，其特征在于所述复合物按如下方法制备：(1)在模具中注入胶原-磷酸盐混合溶液，-20～-80℃冷冻4～24h，再注入5～20mg/mL胶原水溶液，0～8℃条件下静置1～15min后于-20～-80℃冷冻4～24h，最后注入35～45mg/mL的胶原水溶液，0～8℃条件下静置1～15min后于-20～-80℃冷冻4～24h，去除模具，获得致密胶原-多孔胶原-胶原水溶性磷酸盐复合物；所述胶原为水溶性Ⅰ型胶原，所述胶原-磷酸盐混合溶液是将可溶性磷酸盐与10～60mg/mL胶原水溶液混合配制而成，所述可溶性磷酸盐与10～60mg/mL胶原水溶液中胶原的质量比为1～3 : 1；所述胶原-磷酸盐混合溶液、5～20mg/mL胶原水溶液与35～45mg/mL的胶原水溶液的注入体积比为2～6 : 2～5 : 1；(2)将步骤(1)获得的致密胶原-多孔胶原-胶原水溶性磷酸盐复合物迅速放入-20～0℃预冷2～24h的无水乙醇a中，0～10℃浸没反应2～10min，去除无水乙醇a后迅速放入-20～0℃预冷2～24h的0.05～0.5mol/L钙盐的无水乙醇溶液中，0～40℃浸没反应12～48h，去除反应液，获得致密胶原-多孔胶原-胶原纳米羟基磷灰石复合物；(3)在4～28℃、20～40rpm条件下将步骤(2)获得的致密胶原-多孔胶原-胶原纳米羟基磷灰石复合物在无水乙醇b中浸没2～48h，去除无水乙醇b后加入EDC终浓度为4mg/mL的EDC-NHS的MES溶液，在4～28℃、20～40rpm条件下浸没2～8h进行交联，交联结束后去除EDC-NHS的MES溶液，再用pH为7.4～9.0的缓冲液于4～28℃条件下浸没处理12～48h，去除缓冲液后水洗，冷冻干燥，获得所述胶原基骨软骨三层复合物；所述EDC-NHS的MES溶液为1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺以4：1的质量比溶于浓度为10～50g/L，pH=5～7.5的2-吗啉乙磺酸的水溶液制备的蛋白交联剂溶液，所述蛋白交联剂溶液中EDC的终浓度为4mg/mL。 【当前权利人】浙江星月生物科技股份有限公司 【当前专利权人地址】浙江省杭州市余杭区仓前街道海曙路9号3幢2楼 【专利权人类型】其他股份有限公司(非上市) 【统一社会信用代码】9133010055268472XN 【引证次数】10.0 【他引次数】10.0 【家族引证次数】10.0 【家族被引证次数】12

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