【摘要】 本发明公开了一种早期预判不同品种烟草成熟期叶片生物碱相对含量的方法，包括：(1)收集至少两个烟草品种的处于旺长期植株的叶片，分别提取各叶片的总RNA，并逆转录合成cDNA；(2)针对烟草中任一与生物碱合成相关的基因设计特异性引物，利用该特异性引物，以cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR扩增，计算得到各烟草品种所述与生物碱合成相关的基因的相对表达量；(3)预判各烟草品种成熟期叶片的生物碱相对含量；本发明方法克服了现有检测方法只能在烟叶采收后才能对其定量分析的缺陷，避免了现有方法检测的条件限制，为及早判定烟叶生物碱含量开辟新的途径。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江中烟工业有限责任公司; 中国烟草总公司郑州烟草研究院 【申请人类型】企业 【申请人地址】310009 浙江省杭州市上城区建国南路288号 【申请人地区】中国 【申请人城市】杭州市 【申请人区县】上城区 【申请号】CN201210314949.X 【申请日】2012-08-30 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102816852B 【公开公告日】2014-03-26 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102816852B 【授权公告日】2014-03-26 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12Q1/68 【发明人】储国海; 周国俊; 孙勃; 黄芳芳; 林福呈; 杨军; 张芬; 金立锋 【主权项内容】一种早期预判不同品种烟草成熟期叶片生物碱相对含量的方法，包括：(1)收集至少两个烟草品种的处于旺长期植株的叶片，分别提取各叶片的总RNA，并逆转录合成cDNA；(2)针对烟草中任一与生物碱合成相关的基因设计特异性引物，利用该特异性引物，以cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR扩增，计算得到各烟草品种所述与生物碱合成相关的基因的相对表达量；(3)预判各烟草品种成熟期叶片的生物碱相对含量；所述烟草中与生物碱合成相关的基因为：鸟氨酸脱羧酶基因、腐胺N-甲基转移酶基因、甲基腐胺氧化酶基因或喹啉酸磷酸核糖转移酶基因；所述鸟氨酸脱羧酶基因的GenBank号为AF321138.1，所述腐胺N-甲基转移酶基因的GenBank号为D28506.1，所述甲基腐胺氧化酶基因的GenBank号为AB289456.1，所述喹啉酸磷酸核糖转移酶基因的GenBank号为AB038494.1；针对鸟氨酸脱羧酶基因、腐胺N-甲基转移酶基因、甲基腐胺氧化酶基因和喹啉酸磷酸核糖转移酶基因的特异性引物如下表所示：步骤(1)中，叶片取自植株的中部；步骤(1)中，叶片重量为0.1～1g。 【当前权利人】浙江中烟工业有限责任公司; 中国烟草总公司郑州烟草研究院 【当前专利权人地址】浙江省杭州市上城区中山南路77号; 河南省郑州市高新技术开发区枫杨街2号 【专利权人类型】有限责任公司(国有独资); 全民所有制 【统一社会信用代码】91330000142916794U; 9141010041580019XK 【引证次数】5.0 【自引次数】1.0 【他引次数】4.0 【家族引证次数】6.0 【家族被引证次数】1

未经允许不得转载：http://www.zhongzhencnc.com/1791412584.html