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一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法专利

时间:2026-10-03    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 本发明公开了一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果,将假坚强芽孢杆菌(Bacilluspseudofirmus)的L-丙氨酸脱氢酶活性中心附近73位赖氨酸通过PCR定点突变为丙氨酸,构建突变体表达载体,通过原核表达及Ni-NTA亲和层析技术纯化得到突变体酶K73A。所获得的突变体酶K73A之比活力是野生型的202%,而其他酶学性质没有变化。突变体酶蛋白对底物L-丙氨酸的转换数Kcat为376.7min-1,对β-NAD+的转换数Kcat为290.1min-1,分别是野生型的2.0和2.1倍。可用于改善生物法生产丙酮酸及L/D-丙氨酸等的生产工艺。 【专利类型】发明授权 【申请人】河北师范大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】050024 河北省石家庄市南二环东路20号 【申请人地区】中国 【申请人城市】石家庄市 【申请号】CN201210333887.7 【申请日】2012-09-11 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103074309B 【公开公告日】2014-04-16 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN103074309B 【授权公告日】2014-04-16 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N9/06; C12N15/53; C12N15/70; C12R1/19; C12R1/07 【发明人】鞠建松; 徐书景; 赵宝华; 何广正; 李兵杰 【主权项内容】1.一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白,其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。 该数据由<>整理 【当前权利人】河北师范大学 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12130000401703612G 【家族引证次数】3.0 【家族被引证次数】12

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