【摘要】 本发明公开了制备抗汞离子的单克隆抗体及建立测定食品和环境中汞离子含量的酶联免疫吸附分析方法，其特点是选择了一种新的配体即6-巯基烟酸(MNA)，利用其上的羧基将配体与载体蛋白连接，再利用其上的巯基与氯化甲基汞相连，生成的CH3Hg-MNA-载体蛋白用作免疫原及包被抗原；运用杂交瘤抗体制备技术，制备出抗汞离子的单克隆抗体，建立了测定汞离子的间接竞争酶联免疫分析法，并用于食品和环境样品中汞离子的检测。 【专利类型】发明授权 【申请人】苏州大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】215123 江苏省苏州市工业园区仁爱路199号 【申请人地区】中国 【申请人城市】苏州市 【申请号】CN201210042065.3 【申请日】2012-02-23 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102621317B 【公开公告日】2014-06-11 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102621317B 【授权公告日】2014-06-11 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】G01N33/577; G01N33/543 【发明人】邓安平; 王玉珍; 杨红 【主权项内容】1.一种测定汞离子含量的分析方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤一：免疫原和包被抗原的制备；步骤二：汞离子单克隆抗体的制备；步骤三：优化实验条件，建立测定汞离子的酶联免疫吸附分析方法；步骤四：ELISA对加标样品中汞离子含量的测定；其中，所述的步骤一包括：取6-巯基烟酸MNA与等摩尔的N-羟基琥珀酰亚胺NHS和N，N’-二环己基碳二亚胺溶于N，N’-二甲基甲酰胺，反应过夜后离心，上清液缓慢加入40～80mg牛血清白蛋白BSA或卵清蛋白OVA的碳酸氢钠溶液中，搅拌反应2～4小时后，离心，上清液用0.01mol/L PBS溶液透析，得到MNA-BSA或MNA-OVA混合液；然后将氯化甲基汞CH3HgCl溶液缓慢滴入上述溶液，反应后混合液于0.01mol/L的(NH4)2CO3溶液透析，冻干，于-4℃保存；其中CH3Hg-MNA-BSA为免疫原，CH3Hg-MNA-OVA为包被抗原；其中，所述的步骤二包括：免疫、融合、筛选、单克隆抗体的生产。 【当前权利人】苏州大学 【当前专利权人地址】江苏省苏州市工业园区仁爱路199号 【统一社会信用代码】123200004660073435 【引证次数】3.0 【他引次数】3.0 【家族引证次数】3.0 【家族被引证次数】5

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