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靶向TLR2的shRNA干扰载体PLK0.1-TLR2-shRNA构建及鉴定专利

时间:2026-09-28    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 本发明公开了一种靶向TLR2的shRNA干扰载体PLKO.1-TLR2-shRNA构建及鉴定。根据Gene Bank中TLR2的cDNA序列,参考shRNA设计原则,选择cDNA序列上的四个部位作为目标序列,同时将选中的shRNA中的碱基序列随机打乱设计为阴性对照,对照序列经BLAST检测证实与TLR2mRNA及其他基因编码序列无同源性。shRNA模板中的loop结构选用了TTCAAGAGA以避免形成终止信号,shRNA的转录终止序列采用T6结构。正义链模板的5′端添加了CCGG,与Age I酶切后形成的粘端互补;反义链模板的5′端添加了AATTCAAAAA,与EcoR I酶切后形成的粘端互补。成功构建了靶向TLR2的shRNA干扰载体PLKO.1-TLR2-shRNA,并筛选出最佳抑制效率的干扰载体PLKO.1-TLR2-S3,为进一步研究探讨TLR2参与宿主炎症疾病的发病机制和防治具有重要意义。 【专利类型】发明申请 【申请人】苏州中同生物科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】215101 江苏省苏州市吴中区木渎镇金枫南路198号同济大学苏州研究院2号楼4楼 【申请人地区】中国 【申请人城市】苏州市 【申请人区县】吴中区 【申请号】CN201210563603.3 【申请日】2012-12-24 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103882059A 【公开公告日】2014-06-25 【公开公告年份】2014 【IPC分类号】C12N15/867; C12N15/66 【发明人】郑丽丽; 杨艳菊 【主权项内容】一种重组慢病毒质粒载体,其特征是该载体含有大鼠的TLR2的基因干扰片段。 【当前权利人】苏州中同生物科技有限公司 【当前专利权人地址】江苏省苏州市吴中区木渎镇金枫南路198号同济大学苏州研究院2号楼4楼 【专利权人类型】有限责任公司(自然人投资或控股) 【统一社会信用代码】9132050658229321XW

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