【摘要】 本发明提供了一种有效评价梨果实加工能力的生理标记，属于食品加工、果树育种学领域。通过对不同品种梨鲜榨汁褐变程度、总酚含量、酚类物质成分及其含量、多酚氧化酶亲和底物的分析，找出这几种因素之间的关联性，发现梨果实几种含量较高的主要酚类物质中，绿原酸含量与褐变度的灰色关联系数最高，且绿原酸与多酚氧化酶的亲和力最高。明确了总酚含量及绿原酸含量在梨果实酶促褐变中的主导作用，通过对梨果实中总酚及绿原酸含量的综合分析可以有效评价梨果实抗褐变、适加工能力，并为选育抗褐变、适加工梨品种亲本的选择、后代评价筛选及在对梨防褐变技术的开发提供相应的理论依据，具有广泛的应用价值。 【专利类型】发明申请 【申请人】南京农业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】210095 江苏省南京市卫岗1号 【申请人地区】中国 【申请人城市】南京市 【申请人区县】玄武区 【申请号】CN201010256219.X 【申请日】2010-08-18 【申请年份】2010 【公开公告号】CN101995403A 【公开公告日】2011-03-30 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN101995403B 【授权公告日】2012-07-25 【授权公告年份】2012.0 【IPC分类号】G01N21/78; G01N30/02 【发明人】陶书田; 张绍铃; 吴俊; 袁江; 吴华清; 齐开杰 【主权项内容】梨果实加工能力的一种生理标记方法，其特征在于：1)FC法测定果实总酚含量称取果肉5g，用80mL蒸馏水转入100mL容量瓶中，至100℃沸水浴中保温30min，取出，冷却，定容，过滤，滤液为备用提取液；吸取1.0mL样品提取液和浓度为10、20、30、40、50μg/mL的没食子酸标准溶液各1.0mL，分别加入5.0mL水、1mLFC显色剂和3mL质量比7.5％的碳酸钠溶液，摇匀，显色2h，在765nm波长下测定吸光度，得到不同浓度的没食子酸标准曲线，根据没食子酸标准曲线求出样品溶液中的用没食子酸定量的总酚含量μg/mL；其中FC显色剂制备方法为，称取5.0g钨酸钠和1.25g钼酸钠，用35mL蒸馏水溶于100mL回流瓶中，加入2.5mL磷酸和5.0mL盐酸，混匀，微沸回流2h，加入7.5g硫酸锂、2.5mL蒸馏水和数滴溴水，开口沸腾约15min，冷却，定容至50mL，过滤，置棕色瓶中保存备用，使用时加入1倍蒸馏水稀释；没食子酸标准溶液制备方法为，称取0.1g没食子酸，用蒸馏水加热溶解，定容至100mL，此溶液质量浓度为1.0g/L；分别吸取此溶液1、2、3、4、5mL至100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，所得标准溶液的质量浓度分别为10、20、30、40、50μg/mL；2)绿原酸含量的HPLC测定取果肉100g，加入70％丙酮打浆，匀浆超声提取30min后真空抽滤得提取清液，35℃下旋转蒸发去除丙酮，用1mol/L的NaOH调pH至7.0，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次50mL，分离出酯相；剩下的水相用1mol/L的HCL调pH至2.0，再分别用50mL的乙酸乙酯萃取3次，合并酯相，酯相35℃下旋转蒸发，残渣溶于2ml甲醇中备用；绿原酸标准样品购于Sigma公司，用甲醇配制成25、50、100、200、400、800μg/mL浓度标准液备用；高效液相色谱分析：色谱柱：C18柱150mm×4.6mm，Φ5μm；流动相A：水，用磷酸调pH3.20；流动相B：甲醇；柱温：30℃；流速：0.6mL/min；样品液或25、50、100、200、400、800μg/ml浓度绿原酸标准液经0.45μm微孔过滤膜过滤后进色谱柱，进样量5μL；检测波长：280nm；线性梯度淋洗程序为时间min/流动相B的体积百分含量：0/2，3/2，4/25，11/50，16/80，26/80，30/2，35/2；根据吸收峰面积和标准液的浓度计算得到不同浓度绿原酸标准曲线，并根据待测样品中酚类组分在柱中的保留时间与绿原酸标准样品的保留时间相符合，确定组分为绿原酸，通过绿原酸标准曲线算得待测样品液中绿原酸含量μg/mL；3)结果判定用以下公式对所测得总酚含量和绿原酸含量分别进行换算，得到梨果实中总酚和绿原酸的含量mg/kg：当换算得到梨果实中总酚含量低于200mg/kg，且绿原酸含量低于5mg/kg时，褐变度OD420＜0.02，认为该梨品种较适合加工。FSA00000233643700021.tif, FSA00000233643700022.tif 【当前权利人】南京农业大学 【当前专利权人地址】江苏省南京市卫岗1号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000466007562R 【引证次数】3.0 【被引证次数】8 【他引次数】3.0 【被自引次数】1.0 【被他引次数】7.0 【家族引证次数】3.0 【家族被引证次数】8

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