【摘要】本发明提供了一种高纯度地西他滨的工业化生产方法,包括下列步骤:1)以5-氮杂胞嘧啶、六甲基二硅胺烷和三甲基氯硅烷为原料,进行硅烷化反应,制得2,4-二(三甲基硅烷基)-5-氮杂胞嘧啶;2)以第(1)步的产物和1-氯-3,5-二-O-
【摘要】 本发明公开了一种新型大肠杆菌高效分泌表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状质粒DNA载体,包含原核复制起始原点、筛选标记基因和两个串联的外源基因表达盒单元。所述的两个串联的外源目的(靶)基因表达盒单元均分别含有依次排布的tac强启动子、L-门冬酰胺酶信号肽简并基因、外源目的(靶)基因、强转录终止子rrnBT1T2。本发明公开的新型高效分泌表达载体可以在大肠杆菌宿主细胞中高水平分泌表达多肽/蛋白目的产物,表达产物可以自动形成正确的分子内二硫键,并分泌到细胞外周质/及培养液中,十分有利于表达产物的下游分离提取与纯化,具有重要的应用价值。 【专利类型】发明申请 【申请人】中国药科大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】211198 江苏省南京市江宁区龙眠大道639号 【申请人地区】中国 【申请人城市】南京市 【申请人区县】江宁区 【申请号】CN201010617881.3 【申请日】2010-12-31 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102154359A 【公开公告日】2011-08-17 【公开公告年份】2011 【IPC分类号】C12N15/70; C12N15/66; C12N15/11; C07K14/815 【发明人】谭树华; 吴梧桐; 黄翠翠; 吕静 【主权项内容】1.一种环状质粒DNA载体,包含原核复制起始原点、筛选标记基因和两个串联的外源基因表达盒单元。所述的两个串联的外源目的(靶)基因表达盒单元均分别含有依次排布的tac强启动子、L-门冬酰胺酶信号肽简并基因、外源目的(靶)基因、强转录终止子rrnBT1T2。 【当前权利人】中国药科大学 【当前专利权人地址】江苏省南京市江宁区龙眠大道639号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000466006834N 【引证次数】2.0 【被引证次数】4 【自引次数】2.0 【被他引次数】4.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】4
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