【摘要】 本发明提供了一种分离植物低分子量RNA的方法，主要包括：样品处理，DNA和蛋白质的去除，大分子量RNA的去除，低分子量RNA的获得，低分子量RNA的保存。本发明提取低分子量RNA过程中对DNA、大分子量RNA和低分子量RNA采用分级沉淀，用30%聚乙二醇(PEG)和1/3体积的无水乙醇沉淀DNA和大分子量RNA，用2/3体积的无水乙醇沉淀低分子量RNA，实现低分子量RNA的富集；提取过程中操作简便、所需时间短，是一种简单、经济、高效的提取高质量植物低分子量RNA的方法。 【专利类型】发明授权 【申请人】中国热带农业科学院橡胶研究所 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】571737 海南省儋州市中国热带农业科学院橡胶研究所 【申请人地区】中国 【申请人城市】儋州市 【申请号】CN201210327053.5 【申请日】2012-09-06 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102888396B 【公开公告日】2014-06-04 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102888396B 【授权公告日】2014-06-04 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N15/10 【发明人】安泽伟; 李雅超; 谢黎黎; 翟琪麟; 胡彦师; 程汉; 黄华孙 【主权项内容】1.一种分离植物低分子量RNA的方法，包括以下步骤：样品处理、DNA和蛋白质的去除、DNA和大分子量RNA的去除、低分子量RNA的获得、低分子量RNA的保存；样品先经过CTAB提取液处理，CTAB提取液由2%十六烷基三甲基溴化铵, 25mmol/L乙二胺四乙酸, 2mol/L氯化钠, 3%PVP-40, 100mmol/L pH8.0的三羟甲基氨基甲烷, 0.5g/L亚精胺组成，然后去除蛋白质、DNA和大分子量RNA，其特征在于，在RNA上清液中加入1/4体积的30%聚乙二醇6000溶液，混匀后冰浴30min，4℃，13000rpm离心10min；再将离心管中的上清液转移至新的离心管中，加入1/3体积的无水乙醇，混匀后4℃，13000rpm离心5min，从而实现DNA和大分子量RNA的去除。 1.一种分离植物低分子量RNA的方法，包括以下步骤：样品处理、DNA和蛋白质的去除、DNA和大分子量RNA的去除、低分子量RNA的获得、低分子量RNA的保存；样品先经过CTAB提取液处理，CTAB提取液由2%十六烷基三甲基溴化铵, 25mmol/L乙二胺四乙酸, 2mol/L氯化钠, 3%PVP-40, 100mmol/L pH8.0的三羟甲基氨基甲烷, 0.5g/L亚精胺组成，然后去除蛋白质、DNA和大分子量RNA，其特征在于，在RNA上清液中加入1/4体积的30%聚乙二醇6000溶液，混匀后冰浴30min，4℃，13000rpm离心10min；再将离心管中的上清液转移至新的离心管中，加入1/3体积的无水乙醇，混匀后4℃，13000rpm离心5min，从而实现DNA和大分子量RNA的去除。。 【当前权利人】中国热带农业科学院橡胶研究所 【当前专利权人地址】海南省儋州市中国热带农业科学院橡胶研究所 【统一社会信用代码】12100000735845282M 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】4

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