【摘要】 本发明公开一种紫外光谱法测定三聚氰胺含量的方法，步骤：配制pH值4~10Tris-HCl缓冲溶液；用Tris-HCl配制0~10μg/L的三聚氰胺溶液、1.0×10-5~1.5×10-4mol/LDNA溶液，以及三聚氰胺与DNA的混合溶液，以试剂空白为参比, 测定各溶液的吸光度；以三聚氰胺浓度为横坐标、以DNA的吸光度与三聚氰胺与DNA的混合溶液吸光度差值为纵坐标建立工作曲线；将三聚氰胺待测液加入DNA溶液中，测吸光度，根据工作曲线计算三聚氰胺浓度换算出待测液中三聚氰胺相应含量。该方法采用基于三聚氰胺与脱氧核糖核酸相互作用而建立紫外光谱检测技术，方法准确，简单方便，具有可重复性。 【专利类型】发明授权 【申请人】浙江大学宁波理工学院 【申请人类型】学校 【申请人地址】315100 浙江省宁波市鄞州区钱湖南路1号 【申请人地区】中国 【申请人城市】宁波市 【申请人区县】鄞州区 【申请号】CN201210223331.2 【申请日】2012-06-27 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102749301B 【公开公告日】2014-06-18 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102749301B 【授权公告日】2014-06-18 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】G01N21/33 【发明人】沈昊宇; 徐宁逸; 郑惠敏; 柳杨青; 林峰 【主权项内容】1.一种紫外光谱法测定三聚氰胺含量的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤： (1)配制pH值4～10的三羟甲基氨基甲烷-HCl缓冲溶液； (2)用步骤(1)配制的三羟甲基氨基甲烷-HCl缓冲溶液分别配制浓度范围为0～10μg/L的三聚氰胺溶液、浓度范围为1.0×10-5mol/L～1.5×10-4mol/L的DNA溶液，以及三聚氰胺与DNA的混合溶液, 摇匀, 放置2～30min, 以试剂空白即步骤(1)配制的三羟甲基氨基甲烷-HCl缓冲溶液为参比, 在200～500nm波长范围扫描紫外光谱，测定各溶液在260nm的吸光度； (3)以三聚氰胺溶液的浓度为横坐标、以不加三聚氰胺时DNA在260nm的吸光度即DNA溶液在260nm的吸光度与三聚氰胺与DNA的混合溶液在260nm的吸光度的差值为纵坐标，建立工作曲线； (4)将三聚氰胺待测提取液加入与上述步骤(2)配置的浓度相同的DNA溶液中，测定体系在260nm的吸光度，根据工作曲线计算待测液中三聚氰胺的浓度，换算出待测提取液中三聚氰胺的相应含量；所述的DNA为鲱鱼精DNA、小牛胸腺DNA的任意一种。 【当前权利人】浙江大学宁波理工学院 【当前专利权人地址】浙江省宁波市鄞州区钱湖南路1号 【引证次数】1.0 【他引次数】1.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】5

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