【摘要】 本发明涉及免疫学领域，公开了一种荧光原位微量淋巴毒检测方法和试剂盒。该方法将受者血清中IgG抗体的Fab段与供者淋巴细胞表面抗原结合，洗板后加入由补体和抗人IgG轻链的二抗组成的混合液孵育，使所述二抗的Fab段与受者血清中IgG抗体结合，补体与二抗的Fc段结合，然后由补体介导细胞杀伤效应杀死靶细胞，接着进行荧光染色并利用计数法统计供者淋巴细胞的死亡率。本发明所述检测方法增加了抗人IgG轻链的二抗，以其为桥梁提高了补体结合机率，弥补了传统CDC方法由于受者血清抗体滴度较低而导致补体难以结合IgG抗体的缺陷，提高了检测淋巴细胞毒性的准确性和灵敏度，能够应用于器官移植前的配型检测中。 【专利类型】发明授权 【申请人】苏州大学附属第一医院 【申请人类型】机关团体 【申请人地址】215006 江苏省苏州市十梓街188号 【申请人地区】中国 【申请人城市】苏州市 【申请人区县】姑苏区 【申请号】CN201210143662.5 【申请日】2012-05-10 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102636655B 【公开公告日】2014-07-23 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102636655B 【授权公告日】2014-07-23 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】G01N33/96 【发明人】李杨; 何军; 徐超 【主权项内容】一种荧光原位微量淋巴毒检测方法，其特征在于，将受者血清和供者淋巴细胞混匀孵育，使受者血清中IgG抗体的Fab段与供者淋巴细胞表面抗原结合，洗板后加入由补体和抗人IgG轻链的二抗组成的混合液孵育，使所述二抗的Fab段与受者血清中IgG抗体结合，补体与二抗的Fc段结合，然后由补体介导细胞杀伤效应杀死靶细胞，接着进行荧光染色并利用计数法统计供者淋巴细胞的死亡率，所述补体和二抗的体积比为150-250 : 1，所述供者淋巴细胞的存活率大于90%，所述受者血清和供者淋巴细胞的体积比为2 : 1，所述供者淋巴细胞与混合液的体积比为1 : 5。 【当前权利人】苏州大学附属第一医院 【当前专利权人地址】江苏省苏州市十梓街188号 【统一社会信用代码】123200004660027298 【引证次数】4.0 【他引次数】4.0 【家族引证次数】7.0 【家族被引证次数】2

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