【摘要】 本发明公开了一种玉蝉花的纳米组织培养方法，主要通过组织培养过程中初代培养、继代培养、增殖培养、生根培养添加了纳米助剂，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、试管苗生长旺盛的优良效果，玉蝉花的愈伤组织的萌动率达到了98%，增殖倍数达到了4.55倍，生根率达到了100%，而移栽成活率达到了98%。 【专利类型】发明授权 【申请人】常熟市润丰农业有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】215500 江苏省苏州市常熟市尚湖镇罗墩村 【申请人地区】中国 【申请人城市】苏州市 【申请人区县】常熟市 【申请号】CN201210070367.1 【申请日】2012-03-17 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102524082B 【公开公告日】2014-03-05 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102524082B 【授权公告日】2014-03-05 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】A01H4/00 【发明人】李玉弟 【主权项内容】1. 一种玉蝉花的纳米组织培养方法，其特征在于该方法包括下列步骤： (1)外植体的选择：在玉蝉花开花之前取花葶的茎段和分节点作为外植体； (2)材料处理方法：先用无菌水将外植体冲洗干净，去除叶鞘，切成具有1-4个腋芽、长3-5cm段，用0.5g/L的多菌灵溶液浸泡2-3个小时，紫外灯照射20 min，再用75%乙醇消毒30秒钟，用0.1%升汞水浸泡20分钟，无菌水冲洗5-6次，取出材料，切成具有一个腋芽、长度为1cm左右的小段，最后用12%次氯酸钠杀菌30秒，无菌水冲洗5-6次； (3)初代培养：在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了3.0mg/L的6-BA、1.2mg/L的NAA, 30mg/L的蔗糖，5mg/mL-20mg/mL纳米助剂，pH 5.9，培养温度为24℃，光照周期13h/d，光强度为2100-2200lux，待培养出的外植体带芽量长至3个时，即开始下一个阶段； 所述的纳米助剂的制备方法为：将海泡石、蒙脱石粘土混合溶液在0℃下搅拌活化 2 h，加入十二烷基硫酸钠，3×104 r／min高剪切3 h，反应溶液冷却至室温后减压抽滤，所得沉淀在105℃下干燥至恒重，得到纳米助剂； (4)生根培养：将继代培养的高度超过2.5cm的新苗剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了0.7mg/L的IAA、0.5mg/L的NAA，0.2mg/L的GA，28mg/L的蔗糖，pH 5.9，培养温度为24℃，光照周期13h/d，光强度为2100-2200lux，待新苗长至2.3cm左右时，即开始下一个阶段； (5)炼苗移栽：将长高至10-15cm、长根≥５根的组培苗带瓶移至普通大棚内，放置1-3天后打开瓶盖，在25-28℃，湿度70-80％，光强7100-7900lux条件下炼苗3-5天，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土∶草炭∶珍珠岩=3∶2∶2 的混合基质中，温度控制在28℃，前5d 湿度控制在90%左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。。 【当前权利人】常熟市润丰农业有限公司 【当前专利权人地址】江苏省苏州市常熟市尚湖镇罗墩村 【专利权人类型】有限责任公司(非自然人投资或控股的法人独资) 【统一社会信用代码】91320581567837215Y 【引证次数】2.0 【他引次数】2.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】2

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