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一种采用自克隆工程菌发酵生产L-山梨糖的方法专利

时间:2026-09-25    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 本发明公开了一种采用自克隆工程菌发酵生产L-山梨糖的方法,属于采用代谢工程调控策略优化发酵过程技术领域。本发明采用代谢工程的手段,获得自克隆氧化葡萄糖酸杆菌工程菌,以其为生产菌株,通过发酵工艺优化使山梨醇脱氢酶的活性提高了1.33倍;以山梨醇为唯一碳源,发酵36h后,L-山梨糖产量达到225g/L,与出发菌株节相比将发酵时间缩短了12h。本发明通过调控山梨醇脱氢途径,成功实现了山梨醇快速化地导向目标代谢产物山梨糖的目的。为今后利用代谢工程手段改造菌株促进目标产物过量积累提供了一定的借鉴意义。 【专利类型】发明授权 【申请人】江南大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】滨湖区 【申请号】CN201210145148.5 【申请日】2012-05-10 【申请年份】2012 【公开公告号】CN102660599B 【公开公告日】2014-06-18 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN102660599B 【授权公告日】2014-06-18 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12P19/02; C12N15/53; C12N1/21; C12R1/01 【发明人】陈坚; 周景文; 王小北; 堵国成 【主权项内容】一种采用自克隆工程菌发酵生产L-山梨糖的方法,其特征在于以氧化葡萄糖酸杆菌工程菌为生产菌株,接种到种子培养基中,500mL摇瓶装液50mL,于30°C、200rpm条件下培养20-24h;按15%的接种量将培养好的种子接入发酵培养基,30°C,200rpm条件下培养36h;所述氧化葡萄糖酸杆菌工程菌过量表达外源山梨醇脱氢酶基因,其构建方法为:通过化学全合成方法获得Genbank : NC_006677.1所示山梨醇脱氢酶基因,克隆到表达载体pBBR1MCS-2,进一步转化氧化葡萄糖酸杆菌获得自克隆基因工程菌。 【当前权利人】江南大学 【当前专利权人地址】江苏省无锡市蠡湖大道1800号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1210000071780177X1 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】3

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