【摘要】 本发明公开了一种大分子活性胶原蛋白的制备方法，包括以下步骤：鱼皮的预处理；活性胶原蛋白的提取；活性胶原蛋白溶液的纯化。本发明通过超声波、乙酸和复合酶的协同作用提取胶原蛋白，并综合运用盐析、透析和超滤技术制得大分子活性胶原蛋白溶液，并能稳定存在。 【专利类型】发明申请 【申请人】江苏奥普莱医疗用品有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】225600 江苏省扬州市高邮市经济开发区长江路 【申请人地区】中国 【申请人城市】扬州市 【申请人区县】高邮市 【申请号】CN201210276450.4 【申请日】2012-08-06 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103571901A 【公开公告日】2014-02-12 【公开公告年份】2014 【IPC分类号】C12P21/06; C07K1/34; C07K1/14 【发明人】郁帅陆; 黄荣醒; 林琳 【主权项内容】 。1.一种大分子活性胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 一、鱼皮的预处理 选取新鲜鱼皮，100重量份，水洗去肉后，加入20-30% NaCI(0.05M Tris-HCI，pH7.5)溶液中(1 : 20-40，w/v)均质5-10min，用转速为10000-15000rpm高速冷冻离心机离心10-25min，取沉淀，重复上述操作，直到没有浮游脂肪和气泡产生，然后用去离子水清洗； 二、活性胶原蛋白的提取 将预处理后的鱼皮加入预冷的去离子水中(1 : 50-100，w/v)，冰浴，加入乙酸至0.5-1.0M超声10-25min，超声波功率300-600W，加入0.1-0.5重量份胃蛋白酶、酸性酶3350和木瓜蛋白酶中的一种或数种，酶解5-8h，离心，取上清，所得沉淀加去离子水(1 : 50-100)，调pH值至中性，加入0.1-0.5重量份中性蛋白酶、菠萝蛋白酶中的一种或两种，酶解3-6h，离心，取上清，合并两份上清，得胶原蛋白溶液； 三、活性胶原蛋白溶液的纯化 选孔径为10-50nm的超滤膜浓缩上述胶原蛋白溶液，加入NaCl至终浓度为0.5-1.3M，盐析过夜，然后离心10-30min，取沉淀，沉淀再次用0.5-1M乙酸溶解后，离心1-2h，取上清，对0.1-0.2M乙酸透析脱盐，用100-200nm孔径的超滤膜去除小分子物质和多肽，得到浓度为20-50%的大分子活性胶原蛋白溶液。 【当前权利人】江苏奥普莱医疗用品有限公司 【当前专利权人地址】江苏省扬州市高邮市经济开发区长江路 【专利权人类型】有限责任公司(自然人投资或控股) 【统一社会信用代码】91321084682974063W 【被引证次数】10 【被他引次数】10.0 【家族被引证次数】10

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