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野生茄子耐盐基因StNHXl植物表达载体专利

时间:2026-07-31    作者:admin 点击: ( 1 ) 次

【摘要】 本发明涉及野生茄子‘Torvum Vigor’(Solanum torvum Swartz)Na+/H+反向转运体耐盐基因(Na+/H+antiporter gene,StNHX1)植物表达载体的构建,属于分子生物学领域。根据番茄(Solanum lycopersicum)NHX1基因序列,设计引物在野生茄子中扩增StNHX1基因(含有BamH I、Sac I酶切位点),将StNHX1片段替换pBI121的GUS CDS,酶切pBI121载体后将35S prom-StNHX1-NOS term片段连接到pCAMBIA1301质粒,构建成植物表达载体pCAMBIA1301-StNHX1。该植物表达载体转化大豆后将会提高其耐盐性,对提高我国大豆分子育种的技术水平具有重要理论和实践意义。 【专利类型】发明申请 【申请人】南京农业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】210095 江苏省南京市卫岗1号 【申请人地区】中国 【申请人城市】南京市 【申请人区县】玄武区 【申请号】CN201010501811.1 【申请日】2010-10-11 【申请年份】2010 【公开公告号】CN101955972A 【公开公告日】2011-01-26 【公开公告年份】2011 【IPC分类号】C12N15/82; C12N15/29; C12N15/66; A01H5/00 【发明人】朱月林; 盖钧镒; 陈国户; 杨立飞 【主权项内容】野生茄子耐盐基因StNHX1植物表达载体,其构建方法为:1)野生茄子‘Torvum Vigor’中StNHX1耐盐基因的克隆:以野生茄子‘Torvum Vigor’幼嫩叶片为材料,提取叶片总RNA,取2μg总RNA反转录cDNA,设计引物在野生茄子‘Torvum Vigor’叶片cDNA中扩增StNHX1基因:上游引物F:5’‑GCCGGATCCGCCACCATGGGGTTGGATG‑3’下游引物R:5’‑CCCGAGCTCTCAATGACCACATCCTC‑3’将PCR产物连接到pMD19‑T载体上,命名为pMD19‑StNHX1,测序验证;2)StNHX1基因连接至pBI121质粒:BamH I/Sac I双酶切质粒pMD19‑StNHX1回收StNHX1片段,同样双酶切pBI121质粒回收pBI121‑GUS‑;将回收的两片段用T4连接酶连接,命名为p121‑GUS‑‑StNHX1,转化DH5α感受态细胞;3)StNHX1基因连接至pCAMBIA1301质粒构建植物表达载体:HindIII/EcoR I双酶切pBI121‑GUS‑‑StNHX1回收35S prom‑StNHX1‑NOS term片段,同样双酶切pCAMBIA1301质粒回收其大片段;将回收的两片段用T4连接酶连接,命名为pCAMBIA1301‑StNHX1,转化DH5α感受态细胞后进行PCR和酶切验证,构建成功。。数据由整理 【当前权利人】南京农业大学 【当前专利权人地址】江苏省南京市卫岗1号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000466007562R 【被引证次数】5 【被自引次数】1.0 【被他引次数】4.0 【家族被引证次数】5

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