【摘要】 本发明提供的一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法，在无菌操作下取需量的病变组织、分泌物或粪便的临床样本，接种于增菌培养液中，在37℃下恒温培养12-16小时；无菌条件下取需量的培养液，再次接种于同种增菌液中，振荡培养4-6小时；取1-2ml菌液离心，转速为5000转/min，5-6分钟得到菌体沉淀；用双蒸水洗涤菌体2-3遍后，加入100ul无菌双蒸水悬浮，在100℃下煮沸约10-12分钟，离心，转速为12000转/min，3-4分钟得上清液，即为菌粗制DNA，再进行后续的PCR分型检测即可。实验检测中作为阳性对照的标准(或参考)菌株均购自中国菌种保藏中心。 【专利类型】发明申请 【申请人】新疆维吾尔自治区畜牧科学院 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】830000 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市克拉玛依东街151号 【申请人地区】中国 【申请人城市】乌鲁木齐市 【申请人区县】沙依巴克区 【申请号】CN201010171590.6 【申请日】2010-05-13 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102242185A 【公开公告日】2011-11-16 【公开公告年份】2011 【IPC分类号】C12Q1/24; C12Q1/68; C12Q1/04 【发明人】段新华; 王志才; 王登峰; 李建军; 杨学云 【主权项内容】1.一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法，其特征在于：在无菌操作下取需量的病变组织、分泌物或粪便的临床样本，接种于增菌培养液中，在37℃下恒温培养12-16小时；无菌条件下取需量的培养液，再次接种于同种增菌液中，振荡培养4-6小时；取1-2ml菌液离心，转速为5000转/min，5-6分钟得到菌体沉淀；用双蒸水洗涤菌体2-3遍后，加入100ul无菌双蒸水悬浮，在100℃下煮沸约10-12分钟，离心，转速为12000转/min，3-4分钟得上清液，即为菌粗制DNA，再进行后续的PCR分型检测即可。。 【当前权利人】新疆维吾尔自治区畜牧科学院 【当前专利权人地址】新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市克拉玛依东街151号 【引证次数】3.0 【被引证次数】3 【他引次数】3.0 【被他引次数】3.0 【家族引证次数】3.0 【家族被引证次数】3

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