【摘要】 一种适用于赤藓红色素的人工抗原的合成方法，属于生物化工技术领域。本发明以荧光素FLS为半抗原，用活性酯法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，即得赤藓红的人工抗原荧光素FLS-牛血清白蛋白偶联物；用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了荧光素FLS-牛血清白蛋白偶联物，即是适用于赤藓红色素的人工抗原。本发明合成步骤简洁，有效，完全可用于免疫分析中，为以后人们的研究提供了必需的人工抗原，可以满足国内对其研究的需要。。： 【专利类型】发明申请 【申请人】江南大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】滨湖区 【申请号】CN201010600940.6 【申请日】2010-12-23 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102120774A 【公开公告日】2011-07-13 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN102120774B 【授权公告日】2013-04-03 【授权公告年份】2013.0 【IPC分类号】C07K19/00; G01N33/533 【发明人】匡华; 胥传来; 李灼坤; 邢常瑞; 宋珊珊; 刘丽强; 王利兵 【主权项内容】1.一种适用于赤藓红色素的人工抗原的合成方法，其特征是以荧光素FLS为半抗原，用活性酯法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定偶联物的偶联比；步骤为： (1)人工抗原的合成：投料配比为荧光素FLS︰N-羟基硫代琥珀酰亚胺︰碳二亚胺︰牛血清白蛋白的摩尔比控制为60︰68︰90︰1；荧光素FLS溶于含二甲基吡啶的戊二酸酐的无水乙醇和吡啶混合溶液中，75℃搅拌24h后用真空旋转蒸发提纯，再加N, N-二甲基甲酰胺DMF溶剂溶解后，加入N-羟基硫代琥珀酰亚胺和碳二亚胺搅拌反应8h，为A液；牛血清白蛋白溶于0.01M、pH7.4的PBS缓冲液中，为B液；将A液逐滴加入到B液中，室温下搅拌反应6h，离心取上清液，获得荧光素FLS-BSA偶联物混合液，即为适用于赤藓红的人工抗原混合液； 透析袋前处理：取10cm的透析袋，于沸水中煮沸5min，再用60℃的去离子水冲洗3min，保存在4℃去离子水中备用； 将人工抗原混合液移入透析袋中，用每次2L的0.01M的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液透析，透析2次，再用每次2L的去离子水透析，透析2次，共透析3天；最后使用冻干法将透析袋中的液体制成粉末，获得荧光素FLS-BSA偶联物，即为适用于赤藓红的人工抗原； (2)人工抗原的鉴定：荧光素FLS-BSA偶联物采用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其偶联比。 （，） 【当前权利人】江南大学 【当前专利权人地址】江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1210000071780177X1 【被引证次数】2 【被他引次数】2.0 【家族被引证次数】2

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