【摘要】 一种牛奶中新霉素残留的一步ELISA检测方法，属于免疫分析化学技术领域。本发明采用戊二醛法将新霉素(NEO)与牛血清白蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)偶联合成新霉素抗原(免疫原NEO-BSA或包被原NEO-OVA)，利用红外光谱法和SDS-PAGE凝胶电泳法对NEO-BSA进行鉴定，通过免疫获得新霉素抗血清，并用间接ELISA法检测其效价，通过一步ELISA法对新霉素抗血清的特异性进行检测。本发明相对于间接竞争ELISA法，由于极大地缩短了新霉素抗体特异性的检测时间，并且具有很高的灵敏度，达到了简单、快速、灵敏的检测牛奶中的新霉素残留，可广泛的用于快速现场检测。 ： 【专利类型】发明申请 【申请人】江南大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】滨湖区 【申请号】CN201010604438.2 【申请日】2010-12-24 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102128923A 【公开公告日】2011-07-20 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN102128923B 【授权公告日】2013-05-15 【授权公告年份】2013.0 【IPC分类号】G01N33/543; G01N21/17; G01N27/447 【发明人】匡华; 胥传来; 徐乃丰; 屈昌龙; 马伟; 徐丽广; 王利兵 【主权项内容】1.一种牛奶中新霉素残留的一步ELISA检测方法，其特征在于包括新霉素抗原的合成与鉴定，新霉素抗血清效价的测定和新霉素抗血清特异性的检测；(1)新霉素抗原的合成利用戊二醛法合成新霉素免疫原和包被原；(2)新霉素免疫原的鉴定利用步骤(1)得到的新霉素免疫原，通过红外光谱法和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS-PAGE对抗原进行鉴定；(3)制备新霉素抗血清利用步骤(1)得到的新霉素免疫原，通过免疫制备抗新霉素抗血清，即新霉素抗体；(4)新霉素抗体效价的测定利用步骤(3)得到的新霉素抗体，利用新霉素包被原包被酶标板，通过间接ELISA法测定新霉素抗体的效价；(5)新霉素抗体特异性的测定利用步骤(3)得到的新霉素抗体，根据步骤(4)所得新霉素抗体的效价和最适工作浓度，利用一步ELISA法检测新霉素抗体的特异性。 【当前权利人】江南大学 【当前专利权人地址】江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1210000071780177X1 【引证次数】5.0 【被引证次数】12 【自引次数】2.0 【他引次数】3.0 【被他引次数】12.0 【家族引证次数】5.0 【家族被引证次数】12

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