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钝齿棒杆菌N-乙酰谷氨酸激酶突变提高精氨酸产量的方法专利

时间:2026-06-22    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 L-精氨酸是人体内所需半必需碱性氨基酸之一,具有多种独特的生理和药理作用。高产精氨酸突变菌株C.crenatum SYPA5-5以循环途径合成精氨酸,乙酰谷氨酸激酶(NAGK)是其合成途径中关键酶,受到产物精氨酸的反馈抑制。利用重叠PCR技术用编码天冬氨酸的GAT密码子取代了编码NAGK蛋白中287位的甘氨酸的GGA密码子,突变后获得高活性且受精氨酸的反馈抑制作用明显降低的NAGK。将argBSD基因通过pJCl-tac引入高产精氨酸的钝齿棒杆菌中,进一步提高关键酶的表达量。最终产酸水平由原来的28g/L提高至36.3g/L,L-精氨酸产量提高了29.7%。 【专利类型】发明申请 【申请人】江南大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】滨湖区 【申请号】CN201010166997.X 【申请日】2010-05-10 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102021154A 【公开公告日】2011-04-20 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN102021154B 【授权公告日】2012-09-19 【授权公告年份】2012.0 【IPC分类号】C12N9/12; C12N15/54; C12N15/63; C12N1/21; C12P13/10; C12R1/15 【发明人】许正宏; 饶志明; 徐美娟; 张晓梅; 许泓瑜; 窦文芳 【主权项内容】突变型N‑乙酰谷氨酸激酶,将含有如序列表中的SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的N‑乙酰谷氨酸激酶进行定点突变,其中野生型N‑乙酰谷氨酸激酶第287位的甘氨酸被天冬氨酸所取代,使得精氨酸的反馈抑制作用被减弱或解除。 【当前权利人】江南大学 【当前专利权人地址】江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1210000071780177X1 【引证次数】1.0 【被引证次数】21 【自引次数】1.0 【被自引次数】16.0 【被他引次数】5.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】22

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