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一种提取植物DNA的方法专利

时间:2026-05-30    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 一种提取植物DNA的方法,它涉及一种提取DNA的方法。它解决了目前植物DNA提取方法都只对含有少量多糖的植物提取材料有效,对多糖含量高的植物或部位基本无效的问题。提取方法:一、植物提取材料用液氮研磨成粉末,然后转入提取缓冲液I中进行水浴,再离心;二、取步骤一离心沉淀物转提取缓冲液II中进行水浴,之后加入氯仿离心;三、取步骤二离心上清液并加入上清液等体积的异丙醇,混匀后离心,再用乙醇洗涤离心沉淀,然后干燥,即得到植物提取材料的DNA。本发明方法是一种可以广泛使用的植物DNA提取方法,它不受植物提取材料多糖含量的影响,在DNA提取过程中可将植物中的多糖彻底去除,提高了DNA提取的效率、纯度和质量。 【专利类型】发明申请 【申请人】东北林业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】150040黑龙江省哈尔滨市香坊区和兴路26号 【申请人地区】中国 【申请人城市】哈尔滨市 【申请人区县】香坊区 【申请号】CN200810064903.0 【申请日】2008-07-11 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101302509A 【公开公告日】2008-11-12 【公开公告年份】2008 【授权公告号】CN101302509B 【授权公告日】2011-05-04 【授权公告年份】2011.0 【IPC分类号】C12N15/10; C07H1/06; C07H1/00 【发明人】王玉成; 刘桂丰; 李慧玉; 姜静; 杨传平 【主权项内容】1、一种提取植物DNA的方法,其特征在于提取植物DNA按以下步骤进 行:一、植物提取材料用液氮研磨成粉末,然后取0.15~0.25g研磨粉末转入 1mL提取缓冲液I中在温度为45±1℃的条件下水浴10min,再在10000g条件 下离心10min;二、取步骤一离心沉淀物转入0.5~1mL提取缓冲液II中在温 度为65±1℃的条件下水浴10min,之后加入0.5~1mL氯仿在12000g的条件 下离心5min;三、取步骤二离心上清液并加入上清液等体积的异丙醇,混匀 后在10000~12000g条件下离心10min,再用体积浓度为75%、体积为0.5mL 的乙醇洗涤离心沉淀2次,然后室温气干,即得到植物提取材料的DNA;其 中步骤一中的提取缓冲液I由乙二胺四乙酸、NaCl和去离子水组成,提取缓 冲液I中乙二胺四乙酸的浓度为50mmol/L、NaCl的浓度为0.16mol/L;步骤 二中的提取缓冲液II由乙二胺四乙酸、NaCl、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷 基肌氨酸钠、巯基乙醇和去离子水组成,提取缓冲液II中乙二胺四乙酸的浓度 为50mmol/L、NaCl的浓度为1mol/L、十六烷基三甲基溴化铵的浓度为 2.5g/100mL、十二烷基肌氨酸钠的浓度为0.1g/100mL、巯基乙醇的浓度为1 mL/100mL。 【当前权利人】东北林业大学 【当前专利权人地址】黑龙江省哈尔滨市香坊区和兴路26号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】121000004240062542 【被引证次数】11 【被自引次数】2.0 【被他引次数】9.0 【家族被引证次数】11

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