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新构建的L-天门冬酰胺酶工程菌及其发酵培养专利

时间:2026-05-27    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 本发明是关于新构建的产L-天门冬酰胺酶重组 菌及其发酵培养的方法。其中包括:从产L-天门冬酰胺酶的 菌株中分离染色体DNA,引物的设计,用PCR方法钓取酶的 基因,酶基因的序列测定,重组质粒的构建,在几种宿主菌的 表达,工程菌的发酵培养。本方法中,所得到的酶基因区别于 已报道的该酶基因序列,并在个别氨基酸组成上也有差异;工 程菌所采用的培养基便宜易得,发酵方法简单可行,每毫升发 酵液可达120—228单位。 【专利类型】发明申请 【申请人】中国科学院微生物研究所 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】100080北京市海淀区中关村北一条13号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN98102046.1 【申请日】1998-06-01 【申请年份】1998 【公开公告号】CN1237633A 【公开公告日】1999-12-08 【公开公告年份】1999 【授权公告号】CN1093175C 【授权公告日】2002-10-23 【授权公告年份】2002.0 【IPC分类号】C12N9/82; A61K38/50; C12N1/21; C12N15/64; C12R1/19; A61K38/43; C12N9/78 【发明人】钱世钧; 王颖达; 孟广震; 叶军 【主权项内容】 1.一种产L-天门冬酰胺酶的工程菌,其特征在于: 1)该工程菌是由重组质粒pASN在三种宿主菌TG1、JM105、IM602 分别转化而得, 2)该工程菌在合适的培养基、合适的培养条件下,具有强的产L- 天门冬酰胺酶的能力,其酶活力为120-228国际单位/毫升发酵液, 3)该工程菌产生的酶不同于已有的大肠杆菌K-12,酶的分子量为 144000,由四个相同亚基组成,亚基基因全长为1044bp,其中有33个 碱基不同于大肠杆菌K-12,所编码的氨基酸中二个有差别(Ala27和 Asn263)。 【当前权利人】中国科学院微生物研究所 【当前专利权人地址】北京市海淀区中关村北一条13号 【统一社会信用代码】12100000400012318X 【引证次数】3.0 【被引证次数】5.0 【他引次数】3.0 【被他引次数】5.0 【家族引证次数】5.0 【家族被引证次数】5.0

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