【摘要】 本发明涉及一种生物抗菌肽及其制备方法, 本发 明的抗菌肽以林蛙蛙皮为原料, 经除脂除肌肉前处理、溶胀、匀 浆、抽提、离心、沉淀、透析除盐、浓缩、洗脱、收集活力峰 等步骤, 最后制得。本抗菌肽具有制备工艺简单、产率高、抗菌 谱广、杀菌效力高等优点, 可广泛地应用于食品、水果及蔬菜保 鲜及护肤品等领域。。数据由整理 【专利类型】发明申请 【申请人】吉林大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】130012吉林省长春市朝阳区前卫路10号 【申请人地区】中国 【申请人城市】长春市 【申请人区县】朝阳区 【申请号】CN98123799.1 【申请日】1998-10-29 【申请年份】1998 【公开公告号】CN1216768A 【公开公告日】1999-05-19 【公开公告年份】1999 【授权公告号】CN1064050C 【授权公告日】2001-04-04 【授权公告年份】2001.0 【IPC分类号】C07K14/435; C07K1/36; A61K38/17; A61K35/56; A61K35/65 【发明人】李青山; 苟小军; 滕利荣; 王彦忠; 李向晖; 黄程芳 【主权项内容】1、一种用林蛙蛙皮制备生物抗菌肽的方法，其步骤如下： (1)取林蛙干皮或鲜皮，进行除脂，除肌肉的前处理；？？？？ (2)加少量的缓冲液，于4℃～80℃溶胀1～24小时； (3)鲜皮或溶胀后干皮于组织匀浆器中匀浆； (4)加缓冲液，10～100ml/g蛙皮，于4℃～80℃抽提2～72小 时； (5)3000～10000r.p.m, 5～30min离心，收集上清，沉淀。可重 复操作4, 5步骤2～3次； (6)上清液加(NH4)2SO4沉淀，(NH4)2SO4终浓度为20～80％；或沸水浴 5～10min； (7)4000～20000r.p.m, 10～30min离心，收集上清液； (8)合并上清透析24～72小时除盐； (9)透析后上清液超滤浓缩，超滤膜分子量截留值为1000Da，或冻 干浓缩； (10)浓缩液上CM-纤维柱，平衡液为pH4.0～5.0, 0.01～0.1mol/L NaAc-HAc缓冲液，洗脱液为pH5.0～5.5, 0.1～0.5mol/L NaAc-HAc缓冲液梯度洗脱，收集活力峰； (11)活力峰超滤浓缩，超滤膜分子量截留值为1000Da，或冻干浓缩； (12)浓缩液上Sephadex？G-25/G-50柱，洗脱条件为pH6.0～7.0, 0.01～0.1mol/L磷酸缓冲液，收集活力峰； (13)活力峰超滤浓缩，超滤膜分子量截留值为1000Da，或冻干浓缩； (14)浓缩液上制备型HPLC, 10～80％乙腈(0.01％TFA)洗脱，或 梯度洗脱，收集活力峰； (15)活力峰冻干，于零下20℃保存，得从林蛙蛙皮制备的抗菌肽。 【当前权利人】吉林大学 【当前专利权人地址】吉林省长春市朝阳区前卫路10号 【统一社会信用代码】121000004232040648 【被引证次数】33.0 【被自引次数】12.0 【被他引次数】21.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】35.0

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