【摘要】 本发明涉及水处理微生物技术领域，具体涉及一种藻毒素降解菌的原生质体制备与再生。该菌分离自蓝藻脱水压滤液，经鉴定为锤形赖氨酸芽孢杆菌，现保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.6107，保藏名称为MC-LR降解菌R3。本发明主要包括该菌种子培养液的制备、菌丝悬液的制备、细胞壁的酶解、原生质体悬液的制备和原生质体的再生。本发明所采用的原生质体制备与再生，对降解MC-LR的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌R3的原生质体制备率最高可达85.10%，再生率可达38.40%，且制备与再生过程中设备要求低，操作简单，酶解时间与再生周期短，有利于R3后续融合子的制备及工程菌的构建。 【专利类型】发明授权 【申请人】常州大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】213164 江苏省常州市武进区滆湖中路1号 【申请人地区】中国 【申请人城市】常州市 【申请人区县】武进区 【申请号】CN201210573998.5 【申请日】2012-12-26 【申请年份】2012 【公开公告号】CN103013886B 【公开公告日】2014-07-09 【公开公告年份】2014 【授权公告号】CN103013886B 【授权公告日】2014-07-09 【授权公告年份】2014.0 【IPC分类号】C12N1/20; C12R1/07 【发明人】张文艺; 李仁霞; 戴如娟; 郑泽鑫; 占明飞 【主权项内容】1.一种藻毒素降解菌的原生质体制备与再生方法，其特征如下： 从纺锤形赖氨酸芽孢杆菌R3CGMCC NO.6107的斜面培养基中挑取一环菌接入新鲜细菌液体培养基，130r/min、28℃条件下活化培养5-60h至不同的生长期，得到R3种子培养液；继而制备菌丝悬液，32℃、1h条件下酶解细胞壁，进行原生质体悬液的制备; 将上述酶处理前的种子培养液用无菌蒸馏水，酶解后的原生质体悬浮液同时用无菌蒸馏水和浓度为0.55mol/L的NaCl溶液均稀释至10-6、10-7和10-8三个浓度梯度，分别涂布在细菌固体培养基、细菌固体培养基和高渗固体培养基上，置于32℃恒温培养箱中培养24-48h，得到原生质体再生菌落。 【当前权利人】安徽黄河水处理科技股份有限公司 【当前专利权人地址】安徽省马鞍山市雨山西路1800号7栋 【统一社会信用代码】12320000466007300P 【引证次数】4.0 【自引次数】3.0 【他引次数】1.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】3

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