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通过定位改造使极耐热性漆酶基因实现超量表达的方法专利

时间:2026-07-30    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 嗜热栖热菌产生的极耐热性漆酶在纸浆漂白、纺织品脱色、生物质水解液脱毒等工业过程中有很大的应用潜力。但是极耐热性漆酶基因的表达水平很低,不能成为酶源。本发明首次运用pHsh系列的载体对漆酶基因进行克隆、原位诱变和诱导表达。通过对极耐热性漆酶基因特有的序列进行个例分析和多重探索性的定点诱变,本发明取得了减少基因中的稀有密码子、降低GC碱基含量、弱化核酸二级结构的形成等效果,使该基因在大肠杆菌中的表达水平比自然基因提高了317倍。 【专利类型】发明申请 【申请人】南京仙奕基因科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】211135 江苏省南京市麒麟科技创业园(生态科技城)东麒路666号 【申请人地区】中国 【申请人城市】南京市 【申请人区县】江宁区 【申请号】CN201010567825.3 【申请日】2010-12-01 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102061290A 【公开公告日】2011-05-18 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN102061290B 【授权公告日】2013-01-09 【授权公告年份】2013.0 【发明人】张永昌; 郑志强; 邵蔚蓝; 裴建军 【主权项内容】一种通过定位改造使极耐热性漆酶基因实现超量表达的方法,其特征在于:(1)对极耐热性漆酶基因的定位改造的主要着眼于减少大肠杆菌的稀有密码子、降低GC碱基含量、弱化核酸二级结构的形成; (2)除了在成熟肽基因的5’端融合7~12个密码子以外,其余密码子只作同义变换以保持酶的天然性质;(3)定位改造后的基因与自然基因的DNA序列有显著差异;(4)使用pHsh系列的载体对漆酶基因进行克隆、原位诱变和诱导表达。 【当前权利人】仙奕生物科技(南京)有限公司 【当前专利权人地址】江苏省南京市江宁大学城鹏山路9号 【专利权人类型】有限责任公司(自然人投资或控股) 【统一社会信用代码】91320100562884258F 【被引证次数】4 【被他引次数】4.0 【家族被引证次数】4

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