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一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法专利

时间:2026-07-29    作者:admin 点击: ( 0 ) 次

【摘要】 本发明属于土壤微生物学领域,具体涉及一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法。该方法是在细胞裂解前先对样品进行预处理,再将经过预处理后的土样中加入磷酸钠缓冲液和MT缓冲液,分离DNA。本发明通过土壤预处理,去除腐殖质,提高DNA产量,所提取的基质微生物DNA可直接应用于分子操作,具有简便,重复性好,准确可靠的特点。 : 【专利类型】发明申请 【申请人】南京师范大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号 【申请人地区】中国 【申请人城市】南京市 【申请人区县】栖霞区 【申请号】CN201010589338.7 【申请日】2010-12-15 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102094004A 【公开公告日】2011-06-15 【公开公告年份】2011 【发明人】王延华 【主权项内容】1.一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法,其特征在于包括以下步骤: (1)在细胞裂解前对样品进行预处理:称取土样,加入TE缓冲液,涡旋振荡1分钟,放入超声波常温水浴10分钟,上清液中再加TE缓冲液,摇匀,在4℃,10, 000×rpm下离心5分钟,移去上清液; (2)经过预处理后的土样中加入磷酸钠缓冲液和MT缓冲液,置于FastPrep仪器上2分钟,速度5.5,冰上冷却后,在4℃,14, 000×g下离心15分钟,上清液中加入PPS试剂,在4℃,14, 000×g下离心5分钟,上清液中加入Binding Matrix 悬浮液,待蛋白质沉淀,移去上清液,混合物转移至SPINTM滤管中,在4℃,14, 000×g下离心后,加入SEWS-M,在4℃,14, 000×g下离心,移去SPINTM滤管,放入试剂盒提供的试管中,室温干燥5分钟,加入DES和重悬的DNA洗脱液体,在4℃,14, 000×g下离心后转移洗脱的DNA到试管中进行浓度分析,分离的DNA,贮存于-20℃。 【当前权利人】南京师范大学 【当前专利权人地址】江苏省南京市亚东新城区文苑路1号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】123200004660067976 【被引证次数】2 【被他引次数】2.0 【家族被引证次数】2

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