【摘要】 本发明属于土壤微生物学领域，具体涉及一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法。该方法是在细胞裂解前先对样品进行预处理，再将经过预处理后的土样中加入磷酸钠缓冲液和MT缓冲液，分离DNA。本发明通过土壤预处理，去除腐殖质，提高DNA产量，所提取的基质微生物DNA可直接应用于分子操作，具有简便，重复性好，准确可靠的特点。 ： 【专利类型】发明申请 【申请人】南京师范大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号 【申请人地区】中国 【申请人城市】南京市 【申请人区县】栖霞区 【申请号】CN201010589338.7 【申请日】2010-12-15 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102094004A 【公开公告日】2011-06-15 【公开公告年份】2011 【发明人】王延华 【主权项内容】1.一种用于生态土壤系统基质DNA的提取方法，其特征在于包括以下步骤： (1)在细胞裂解前对样品进行预处理：称取土样，加入TE缓冲液，涡旋振荡1分钟，放入超声波常温水浴10分钟，上清液中再加TE缓冲液，摇匀，在4℃，10, 000×rpm下离心5分钟，移去上清液； (2)经过预处理后的土样中加入磷酸钠缓冲液和MT缓冲液，置于FastPrep仪器上2分钟，速度5.5，冰上冷却后，在4℃，14, 000×g下离心15分钟，上清液中加入PPS试剂，在4℃，14, 000×g下离心5分钟，上清液中加入Binding Matrix 悬浮液，待蛋白质沉淀，移去上清液，混合物转移至SPINTM滤管中，在4℃，14, 000×g下离心后，加入SEWS-M，在4℃，14, 000×g下离心，移去SPINTM滤管，放入试剂盒提供的试管中，室温干燥5分钟，加入DES和重悬的DNA洗脱液体，在4℃，14, 000×g下离心后转移洗脱的DNA到试管中进行浓度分析，分离的DNA，贮存于-20℃。 【当前权利人】南京师范大学 【当前专利权人地址】江苏省南京市亚东新城区文苑路1号 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】123200004660067976 【被引证次数】2 【被他引次数】2.0 【家族被引证次数】2

未经允许不得转载：http://www.zhongzhencnc.com/1785207794.html