【摘要】 本发明公开了一种核磷蛋白NPM1基因突变的联合检测方法及诊断试剂盒，通过对NPM1突变基因NPM1-mutA、NPM1-mutB、NPM1-mutD设计引物和探针，将探针与微球共价结合形成的探针微球混合物，与逆转录PCR扩增产物杂交，加入链霉亲和素藻红蛋白后，可检测出不同微球的荧光信号，从而确定待检测样品中是否含有NPM1基因突变及突变基因的表达状况。本发明所述的方法及试剂盒具有高灵敏度、高通量性、检测快速、准确等优点，能够对NPM1基因突变进行定性和定量检测，为急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合症(MDS)的早期诊断、复发、治疗方案的确定以及预后的判断提供重要的参考依据。 【专利类型】发明申请 【申请人】江苏迈迪基因生物科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】214192 江苏省无锡市锡山经济开发区芙蓉中三路99号科技创业园530大楼305 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】锡山区 【申请号】CN201010202653.X 【申请日】2010-06-17 【申请年份】2010 【公开公告号】CN101955994A 【公开公告日】2011-01-26 【公开公告年份】2011 【授权公告号】CN101955994B 【授权公告日】2013-01-23 【授权公告年份】2013.0 【IPC分类号】C12Q1/68; G01N21/64 【发明人】邵棠; 陈鸣 【主权项内容】一种NPM1基因突变的联合检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)包含多种不同荧光编码的羧基微球Beads，每种微球上分别共价结合针对NPM1的多种突变基因的mRNA所设计的特异性核酸探针；所述的NPM1的多种突变基因包含以下任意一种基因或任意组合的多种基因：NPM1‑mutA、NPM1‑mutB和NPM1‑mutD；(2)针对NPM1的多种突变基因的mRNA，分别设计上下游引物，对不同的突变基因的mRNA，通过逆转录PCR扩增出相应的产物；(3)含有特异性核酸探针的微球与NPM1突变基因mRNA的逆转录扩增产物混合杂交，加入链霉亲和素‑藻红蛋白Streptavidin‑PE后，通过液相芯片xMAP方法检测荧光信号；(4)将检测到的荧光信号与内参基因的荧光信号进行比较，从而确定检测样品中是否存在NPM1突变基因，和/或样品中突变基因的表达状况。 【当前权利人】江苏迈迪基因生物科技有限公司 【当前专利权人地址】江苏省无锡市锡山经济开发区芙蓉中三路99号科技创业园530大楼305 【专利权人类型】外商投资企业 【统一社会信用代码】91320205668963149M 【引证次数】2.0 【被引证次数】6 【他引次数】2.0 【被他引次数】6.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】6

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