【摘要】 一种重金属铜人工抗原的合成方法，属于生物化工技术领域。本发明以二乙烯三胺五乙酸(DTPA)为螯合剂，将铜离子与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，成功合成了重金属铜的人工抗原，所制备的产品用于重金属的免疫分析方法研究。本发明合成步骤简洁，有效，可完全用于免疫分析中，为以后人们的研究提供了方便的途径，可以满足国内对重金属免疫分析方法研究的需要。 【专利类型】发明申请 【申请人】江南大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【申请人地区】中国 【申请人城市】无锡市 【申请人区县】滨湖区 【申请号】CN201010208285.X 【申请日】2010-06-18 【申请年份】2010 【公开公告号】CN102219852A 【公开公告日】2011-10-19 【公开公告年份】2011 【IPC分类号】C07K14/765; C07K1/113 【发明人】胥传来; 陈莲君; 邓小芳; 马文蔚; 严文静; 勇倩倩 【主权项内容】1.一种重金属铜人工抗原的合成方法，其特征在于以二乙烯三胺五乙酸DTPA为螯合剂，将铜离子与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联； (1)重金属铜人工抗原的合成： 称取0.147g的氯化铜溶于1mL浓硝酸中制备成铜离子溶液； 称取6mg的DTPA至1.5mL离心管中，先加入10μL的10mol/L的KOH溶液，再加入990μL的p H 9.7、0.1mol/L的羟乙基哌嗪乙硫磺酸HEPES溶液，溶解后即制备成DTPA螯合剂溶液； 称取0.25g牛血清白蛋白BSA溶于5mL、0.1mol/L、pH值为7.4的HEPES溶液中制备成50mg/mL的BSA溶液； 先往反应器中加入520μL的DTPA螯合剂溶液，再加入12μL的铜离子溶液，在室温下在磁力搅拌器上反应1h以上，形成半抗原反应液； 往半抗原反应液中几乎同时加入500μL的BSA溶液和200μL的0.1mol/L、pH值为9.7的HEPES溶液，调节pH值至9.0；反应过夜后用Centricon-30超滤离心管对蛋白质复合物进行分离纯化，即得重金属铜人工抗原； (2)重金属铜人工抗原的鉴定：重金属铜人工抗原采用凝胶电泳法鉴定其偶联结果，利用标准蛋白得到标准曲线，计算其偶联比。。 【当前权利人】江南大学 【当前专利权人地址】江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学食品学院 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1210000071780177X1 【被引证次数】1 【被他引次数】1.0 【家族被引证次数】1

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