【摘要】 本发明叙述了一种以含有HSV1全基因组的5个 粘粒(cos6, cos28, cos14, cos56, cos48)为基础的简便而高效地产 生重组单纯疱疹病毒的方法。将含有外源基因的粘粒与其余4 个粘粒等摩尔混合, 经PacI酶切后共转染对HSV－1感染敏感 的细胞, 通过5个HSV片段的同源重组而产生含有外源基因的 重组单纯疱疹病毒。依照这种方法, 产生了能表达大肠杆菌lacZ 基因的单纯疱疹病毒HSV1－lacZ100。HSV1－lacZ100的用途 有 : 1)作为研究神经传导的示踪剂; 2)作为抗单纯疱疹病毒药物及 其它抗病毒药物的靶病毒; 3)作为HSV1扩增子载体研究中的辅助 病毒以更灵敏地监测辅助病毒滴度变化。 【专利类型】发明申请 【申请人】病毒基因工程国家重点实验室 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】100052北京市宣武区迎新街100号朱丽辉 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】西城区 【申请号】CN98101753.3 【申请日】1998-05-04 【申请年份】1998 【公开公告号】CN1234441A 【公开公告日】1999-11-10 【公开公告年份】1999 【授权公告号】CN1120238C 【授权公告日】2003-09-03 【授权公告年份】2003.0 【IPC分类号】C12N7/01; A61K39/245; C12R1/91; A61P31/00; A61P31/22 【发明人】吴小兵; 伍志坚; 董小岩; 侯云德 【主权项内容】1．一种用于产生重组单纯疱疹病毒的方法，由以下步骤组成： (1)SetC为一套含有HSV117株全基因组DNA的5个重组粘粒。由cos6, cos28, cos14, cos56 及cos48组成。 (2)将外源基因X表达盒DNA片段的两端加XbaⅠ接头，插入重组粘粒cos56的单一XbaⅠ位点 中构成cos56-X。将cos6, cos28, cos14, cos56-X及cos48？5个粘粒的组合命名为Set？X。 (3)将Set？X(5个粘粒摩尔量相等)DNA经PacⅠ酶切后，用脂质体方法共转染HSV敏感细胞， 被导入的5个片段在细胞中发生同源重组而生成重组病毒HSV1-X毒种。 (4)将得到的毒种进行空斑筛选和纯化，获得重组病毒HSV1-X.。 【当前权利人】本元正阳基因技术股份有限公司 【当前专利权人地址】北京市北京经济技术开发区永昌中路6号 【被引证次数】8.0 【被自引次数】2.0 【被他引次数】6.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】8.0

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